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Vorbereitung von Neutral-aufgeladenen, pH-responsiven polymischen Nanopartikeln für zytosolische ...
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JoVE Journal Bioengineering
Preparation of Neutrally-charged, pH-responsive Polymeric Nanoparticles for Cytosolic siRNA Delivery

Vorbereitung von Neutral-aufgeladenen, pH-responsiven polymischen Nanopartikeln für zytosolische siRNA Delivery

Full Text
8,031 Views
09:09 min
May 2, 2019

DOI: 10.3791/59549-v

John Hendershot1, Adam E. Smith1, Thomas A. Werfel1,2,3

1Department of Chemical Engineering,University of Mississippi, 2Department of BioMolecular Sciences,University of Mississippi, 3Biomedical Engineering Program,University of Mississippi

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Es werden Methoden zur Vorbereitung und Charakterisierung der physikalisch-chemischen Eigenschaften und der Bioaktivität von neutral aufgeladenen, pH-responsiven siRNA-Nanopartikeln vorgestellt. Es werden Kriterien für erfolgreiche siRNA-Nanomedizine wie Größe, Morphologie, Oberflächenaufladung, siRNA-Ladung und Gen-Schweigung diskutiert.

Das aktuelle Protokoll ist von Bedeutung, da es forschern ermöglicht, siRNA-geladene Nanopartikel herzustellen und diese Nanopartikel angemessen zu charakterisieren, um ihre Eignung für die Verabreichung an Tiere vor späteren Studien zu gewährleisten. Der Vorteil dieses Ansatzes besteht darin, Nanopartikel zu produzieren, die die Bioverfügbarkeit von siRNA erhöhen, und Nanopartikel zu produzieren, die neutral geladen und somit für die systemische Verabreichung geeignet sind. Diese Technik ist wirkungsvoll, da siRNA-Nanopartikel zur Behandlung einer Vielzahl von Krankheiten eingesetzt werden können, die eine systemische Verabreichung erfordern, darunter Krebs, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Autoimmunerkrankungen, unter anderem.

Zunächst polymer in Ethanol in einer Konzentration von 33,3 Milligramm pro Milliliter auflösen und rühren, um die Auflösung zu gewährleisten. Dann verwenden Sie eine Pipette, um Polymerlösung in 10 Millimolaren Zitronensäurepuffer zu übertragen, um eine Konzentration von 3,33 Milligramm pro Milliliter zu erreichen. Fügen Sie destilliertes Wasser in eine Röhre mit kleiner störender RNA ein, um eine Konzentration von 50 Mikromolaren zu erreichen.

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