Trennung von Immunzellsubpopulationen in peripheren Blutproben von Kindern mit infektiöser Mononukleose

Diese Methode wird die Charakterisierung verschiedener Immunzellen in den gleichen Krankheitszuständen von Personen mit IM ermöglichen, was unser Verständnis des Mechanismus der EBV-Infektion erweitern wird. Linlin Zhang, eine Ärztin aus unserem Labor, demonstriert das Verfahren. Nehmen Sie zunächst die PBMCs, die zuvor in einem 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen isoliert wurden, und drehen Sie sie bei 300 G für 10 Minuten bei Raumtemperatur.

Verwerfen Sie den Überstand und suspendieren Sie die Zellen mit 80 Mikrolitern des vorbereiteten Puffers. Als nächstes fügen Sie der Zellsuspension 20 Mikroliter CD 14-Mikrokügelchen hinzu, die durch Pipettieren gut gemischt werden, und inkubieren Sie das Röhrchen für 15 Minuten auf Eis. Dann waschen Sie die PBMCs mit einem Milliliter Puffer und zentrifugieren Sie bei 300 G für 10 Minuten bei Raumtemperatur.