Name: Optimierung der extrazellulären Vesikelabgabe mit einem 3D-biogedruckten Gerüst für die Behandlung chronischer Wunden (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-28T14:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 17 s
Description: Lernen Sie die Herstellung eines 3D-biogedruckten Kern-Mantel-Gerüsts aus Alginat und Carboxymethylcellulose zur kontrollierten Freisetzung extrazellulärer Vesikel bei der Behandlung chronischer Wunden.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>23 G Purple Präzisions-Konusdüse</td><td>Cellink</td><td>KT0000002000</td><td>Um eine präzise Extrusion von Biotinten mit minimaler Verstopfung zu gewährleisten</td></tr>, <tr><td>Alginat-Lyase (AlgLyase)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A1603-100MG</td><td>Algyase ist ein Enzym, das Alginat abbaut.</td></tr><tr><td>Amicon Ultra-Zentrifugalfilter, 30 kDa MWCO</td><td>Merck</td><td>UFC9030</td><td>Zur Reinigung von PKH-26-markierten EVs</td></tr><tr><td>BCA-Assay-Kit</td><td>Thermo Scientific</td><td>10678484</td><td>Zur Bestimmung der Protein/EVs-Konzentration</td></tr><tr><td>Bioprinting-System</td><td>Regemat</td><td>V1</td><td>Zur Herstellung von Kern-Mantel-Gerüst</td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin (BSA)</td><td>sigma-aldrich</td><td>05470-5G</td><td>Zur Beendigung der PKH 26-Reaktion&nbsp;</td></tr><tr><td>Calciumchlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3306-100G</td><td>Zur Vernetzung und Stabilisierung von Biotinten im Tissue Engineering</td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Sigma</td><td>2-16P</td><td>Zur Isolierung von Elektrofahrzeugen</td></tr><tr><td>Zentrifuge 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>22625101</td><td>Zur Zellkultur</td></tr><tr><td>Biologische Sicherheitswerkbank der Klasse II</td><td>Telstar</td><td>Bio II Advance</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>CryoCube F570 Serie - ULT Gefrierschrank</td><td>Eppendorf</td><td>F571240035</td><td>Zur Aufbewahrung von EVs</td></tr><tr><td>Fluoreszenzmikroskop</td><td>OLYMPUS&nbsp;</td><td>IX73P1F&nbsp;</td><td>Wird verwendet, um das restliche PKH-26 im Filtrat zu überprüfen</td></tr><tr><td>Gentamicin (50 mg/ml)</td><td>Thermofisher</td><td>15750</td><td>Antibiotikum für Zellkulturmedien</td></tr><tr><td>GlutaMAX-I CTS, (100X), flüssig</td><td>Thermofisher</td><td>A12860</td><td>Nahrungsergänzungsmittel für Zellkulturmedien</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7647-01-0</td><td>Puffervorbereitung&nbsp;</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Carl Roth</td><td>Kunst. Nr.&nbsp; 6763.3</td><td>Zubereitung von Puffern</td></tr><tr><td>Hochviskose Carboxymethylcellulose (CMCh)</td><td>BDH</td><td>27929 4T</td><td>CMCh ist ein wasserlösliches Cellulosederivat.</td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>New Brunswick</td><td>&nbsp; NB-170R</td><td>Invivo-Bildgebung für Zellkulturen</td></tr><tr><td></td><td>PerkinElmer</td><td>IVIS Lumina XRMS Serie III</td><td>Um die Freisetzung von Elektrofahrzeugen in vivo zu verfolgen</td></tr><tr><td>Magnetrührer</td><td>SalvisLAB</td><td>MC35</td><td>Für die Vorbereitung von Biotinten</td></tr><tr><td>miRCURY Exosomen-Kits für die Isolierung von Exosomen</td><td>Qiagen</td><td>76743</td><td>Evs Isolierung</td></tr><tr><td>NaOh</td><td>Daejung</td><td>1310-73-2</td><td>Puffervorbereitung&nbsp;</td></tr><tr><td>phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61196. AP</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>PKH 26</td><td>MCE</td><td>154214-55-8</td><td>Roter Fluoreszenzfarbstoff zur Markierung der EVs</td></tr><tr><td>Natriumalginat (Alg)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A0682-100G</td><td>Natürliches Polysaccharid, das aus Braunalgen gewonnen wird.</td></tr><tr><td>Natriumchlorid (NaCl)</td><td>Carl Roth</td><td>Art-Nr-P029.1</td><td>Präparation von Puffern&nbsp;</td></tr><tr><td>StemPro BM Mesenchymale Stammzellen</td><td>Thermofisher</td><td>A1382901</td><td>Mesenchymale Stammzellen</td></tr><tr><td>StemPro MSC SFM XenoFree</td><td>Thermofisher</td><td>A1067501</td><td>Zellkulturmedien</td></tr><tr><td>Trypsin 0,25%</td><td>Thermofisher</td><td>25050014</td><td>Zelldissoziations-Vortex-Mischer</td></tr><tr><td></td><td>Daihan Scientific</td><td>VM-10</td><td>Wird zum Mischen von Fällungspuffer mit dem konditionierten Medium</td></tr></tbody> verwendet</table>

optimierung der extrazellulären vesikelabgabe mit einem 3d-biogedruckten gerüst für die behandlung chronischer wunden

Optimizing Extracellular Vesicle Delivery Using a Core-Sheath 3D-Bioprinted Scaffold for Chronic Wound Management

Die In-vivo-Freisetzung von EVs sowohl aus den Alg-EVs/CMCh- als auch aus den Alg-EVs/CMCh-AlgLyase-Gerüsten ist in Abbildung 1B,C dargestellt. Wie erwartet zeigte das Alg-EVs/CMCh-AlgLyase-Gerüst im Vergleich zu Alg-EVs/CMCh ein schnelleres Freisetzungsprofil, insbesondere zu den Zeitpunkten 2 h und 4 h. Die Freisetzung von EVs aus Hydrogelen wird durch eine Kombination physikalisch-chemischer Mechanismen gesteuert, darunter Diffusion, Quellung, Erosion und Abbau<s...

Optimierung der extrazellulären Vesikelabgabe mit einem 3D-biogedruckten Gerüst für die Behandlung chronischer Wunden

This study outlines a detailed protocol for the fabrication of core-sheath 3D-bioprinted scaffolds designed to enhance chronic wound healing. The protocol ...

optimizing-extracellular-vesicle-delivery-using-core-sheath-3d

Research

Forschung

JoVE Journal

Bioengineering

Biotechnik

Um hochorganisierte Strukturen aus komplexem Gewebe zu erzeugen, muss man mehrere Materialien und Zelltypen zu einem integrierten Komposit zusammenfügen.  Dieses kombinatorische Design umfasst organspezifische geschichtete Zellblätter mit zwei unterschiedlichen biologisch abgeleiteten Materialien, die eine starke fibröse Matrixbasis enthalten, und Endothelzellen zur Verbesserung der Bildung neuer Gefäße.

Tissue Engineering: Aufbau eines Multizelluläre 3D Gerüst für die Lieferung von Layered Zellschichten

Ein kartesischer Biodrucker wurde entworfen und hergestellt, um die Abscheidung mehrerer Materialien in präzisen, reproduzierbaren Geometrien zu ermöglichen und gleichzeitig die Kontrolle von Umweltfaktoren zu ermöglichen. Unter Verwendung des dreidimensionalen Biodruckers können komplexe und lebensfähige Konstrukte gedruckt und leicht reproduziert werden.

Lebensfähigkeit Bioprinted Cellular Konstrukte unter Verwendung einer Drei Dispenser kartesischen Drucker

Wir bieten ein generalisiertes Protokoll basiert auf einer mikrofluidische Bioprinting Strategie für engineering-ein Microfibrous Kreislauf Bett, wo eine sekundäre Zelle Art weiter in den interstitiellen Raum dieser Microfibrous Struktur, vaskularisierte Gewebe und Organellen zu generieren ausgesät werden konnte.

Mikrofluidische Bioprinting für Engineering durchblutet, Gewebe und Organellen

Dieser Artikel beschreibt die Technik der Expansion einer traditionellen, zwei-Dimension (2D) Electrospun Nanofaser-Matte in leska 3 Dimension (3D) durch die Druckentlastung der unterkritischen CO2 Flüssigkeit. Diese erweiterte Gerüste sind 3D, eng mimischen zellulären Nanotopographic Hinweise, und bewahren die Funktionen der biologischen Moleküle innerhalb der Nanofasern gekapselt.

Expansion des zwei-Dimension Electrospun Nanofaser Matten in drei Dimension Gerüste

Präsentiert wird hier ein einfach zu bedienender, Kern-/Schalen-, dreidimensionaler Bioprinting-Aufbau für die einstufige Fertigung von Hohlgerüsten, geeignet für die Gewebetechnik von Gefäß- und anderen Röhrenstrukturen.

Core/Shell DruckGerüste für Tissue Engineering von Röhrenstrukturen

Künstliche Gewebe sind stark auf geeignete vaskuläre Netzwerke angewiesen, um lebenswichtige Nährstoffe und Gase bereitzustellen und Stoffwechselabfälle zu entfernen. In dieser Arbeit erstellt ein schrittweises Seeding-Protokoll von Endothelzellen und Stützzellen hochorganisierte vaskuläre Netzwerke in einer Hochdurchsatzplattform, um das Entwicklung des Gefäßverhaltens in einer kontrollierten 3D-Umgebung zu untersuchen.

Schrittweise Zellaussaat auf tessellierten Gerüsten zur Untersuchung keimender Blutgefäße

In diesem Manuskript demonstrieren wir die Herstellung einer biohybriden Hydrogel-Biotinte, die Graphen für den Einsatz im peripheren Tissue Engineering enthält. Unter Verwendung dieses 3D-Biohybridmaterials wird das neuronale Differenzierungsprotokoll von Stammzellen durchgeführt. Dies kann ein wichtiger Schritt sein, um ähnliche Biomaterialien in die Klinik zu bringen.

Herstellung und Charakterisierung von Graphen-basierter 3D-Biohybrid-Hydrogel-Biotinte für das periphere Neuroengineering

Konstruierte Klappen erfordern ein integriertes funktionelles Gefäßnetzwerk. In diesem Protokoll stellen wir eine Methode zur Herstellung einer 3D-gedruckten Gewebeklappe vor, die ein hierarchisches Gefäßnetzwerk und seine direkten mikrochirurgischen Anastomosen an der Oberschenkelarterie der Ratte enthält.

Herstellung von technischen Gefäßklappen mit 3D-Drucktechnologien

Diese Arbeit beschreibt ein Protokoll für den Freiform-eingebetteten 3D-Druck von neuralen Stammzellen in selbstheilenden, annealbaren Partikel-extrazellulären Matrixkompositen. Das Protokoll ermöglicht die programmierbare Strukturierung von miteinander verbundenen menschlichen Nervengewebekonstrukten mit hoher Genauigkeit.

Mikrogel-extrazelluläre Matrix-Komposit-Unterstützung für den eingebetteten 3D-Druck menschlicher neuronaler Konstrukte

Wir stellen ein Protokoll für die Hochdurchsatzproduktion von Gefäßkanälen mit flexiblen Größen und gewünschten Mustern auf einer Standard-Sechs-Well-Platte unter Verwendung der 3D-Bioprinting-Technologie vor, die als Gefäße auf einer Platte (VOP) bezeichnet wird. Diese Plattform hat das Potenzial, die Entwicklung von Therapeutika für die mit einem kompromittierten Endothel verbundenen Erkrankungen voranzutreiben.

Hochdurchsatz-Bioprinting-Verfahren zur Modellierung der Gefäßpermeabilität in Standard-Sechs-Well-Platten mit Größen- und Musterflexibilität

Lernen Sie die Herstellung eines 3D-biogedruckten Kern-Mantel-Gerüsts aus Alginat und Carboxymethylcellulose zur kontrollierten Freisetzung extrazellulärer Vesikel bei der Behandlung chronischer Wunden.

Optimierung der extrazellulären Vesikelabgabe mit einem 3D-biogedruckten Gerüst für die Behandlung chronischer Wunden

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