Name: MALDI-ToF MS-Methode zur Charakterisierung von synthetischen Polymeren mit unterschiedlicher Dispersität und Endgruppen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 16 s
Description: Lernen Sie die MALDI-ToF MS-Methode zur Charakterisierung synthetischer Polymere mit unterschiedlicher Dispersität und Endgruppen. Dieses Protokoll ermöglicht präzise Massenspektrometrie-Analysen für die Polymerchemie.

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ACHTUNG: Lesen Sie vor der Verwendung die Sicherheitsdatenblätter (SDB) für alle Chemikalien. Führen Sie alle Probenvorbereitungen und MALDI-ToF-MS-Plattenvorbereitungen in einem Abzug durch und tragen Sie geeignete persönliche Schutzausrüstung (PSA), einschließlich Schutzbrille, Laborkittel und Handschuhe.
1. Vorbereitung der Probe
<ol>
	<li>Herstellung von Matrix-, Kationen-, Kalibrierungs- und Analyt-Stammlösung<ol>
		<li>Bereiten Sie die alkalische Kationen-Stammlösung vor, indem Sie 2 mg des gewünschten Kations in 1 ml eines Lösungsmittels lösen, das aufgrund seiner Verträglichkeit mit dem Analyten und dem Kation ausgewählt wurde. Für Probe 1 wurden 2 mg Natriumtrifluoracetat in 1 ml THF gelöst.</li>
		<li>Bereiten Sie die Matrixstammlösung vor, indem Sie 20 mg der gewünschten Matrix in 1 ml eines kompatiblen Lösungsmittels auflösen, basierend auf der Löslichkeit des Analyten. Beispiel: Für die repräsentativen Daten (Probe 1) lösen Sie 20 mg DCTB in 1 ml Tetrahydrofuran (THF).</li>
		<li>Bereiten Sie die kalibrierende Stammlösung vor, indem Sie die Anweisungen des Lieferanten befolgen.</li>
		<li>Bereiten Sie die Analytlösung vor, indem Sie 10 mg des Analyten in 1 ml eines geeigneten Lösungsmittels auflösen. Für Probe 1 werden 10 mg des Analyten in 1 ml THF gelöst.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Vorbereitung der MALDI-ToF MS Zielplatte<ol>
		<li>Reinigen Sie die MALDI-ToF MS Zielplatte.</li>
		<li>Bereiten Sie die Analytaufnahmeprobe und die Kalibrierprobenlösung vor. Geben Sie die Kationen-, Analyt- und Matrixstammlösungen in einem Verhältnis von 1:5:20 μl in das Röhrchen A und den Vortex. Für die externe Kalibrierung: Geben Sie das Kationen-, Kalibrierungsmittel und die Matrixstammlösungen in einem Verhältnis von 1:5:20 μl in das Röhrchen B und den Vortex.</li>
		<li>Geben Sie das Gemisch aus Analyt und Kalibrant der Probenlösung auf die MALDI-ToF MS-Zielplatte. Pipettieren Sie 0,5 μl des Kationen:Analyt:Matrix-Probenlösungsgemisches (Röhrchen A) mit der Methode der getrockneten Tröpfchen auf die MALDI-ToF MS-Zielplatte. Pipettieren Sie 0,5 μl des Kationen:Kalibrant:Matrix-Gemisches (Röhrchen B) mit der Methode der getrockneten Tröpfchen auf eine Stelle neben dem Analyten auf der MALDI-ToF MS-Zielplatte. Notieren Sie die genaue Position jedes Spots (Zeilenbuchstabe und Spaltennummer), um die Probe und das Kalibrant während der Datenerfassung leicht zu lokalisieren.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Datenerfassung
<ol>
	<li>Setzen Sie die MALDI-ToF MS-Zielplatte ein und wählen Sie eine Erfassungsmethode<ol>
		<li>Setzen Sie die MALDI-ToF MS-Zielplatte in das Gerät ein. Setzen Sie die Zieltafel in der richtigen Ausrichtung auf die Halterung und schieben Sie die MALDI-ToF MS Zieltafel nicht zu weit hinein.</li>
		<li>Docken Sie die MALDI-ToF MS-Zielplatte mit der Gerätesteuerungssoftware an das Gerät an.</li>
		<li>Wählen Sie eine Methodendatei in der Gerätesteuerungssoftware aus und öffnen Sie sie. Wählen Sie eine reflektorpositive (RP) oder eine linear positive (LP) Methode innerhalb des Massenbereichs des Analyten.</li>
		<li>Überwachen Sie die Gerätesteuerungssoftware, um zu bestätigen, dass die Zielplatte eingesetzt wurde und die Einrichtung der Methode abgeschlossen ist. HINWEIS: Diese repräsentativen Polymere enthalten Sauerstoff; Daher wird der positive Modus gewählt (bei den meisten Verbindungen ist die Erfassung im positiven Modus abgeschlossen). Für die repräsentativen Daten wurde eine RP-Methode für den Reflektormodus an allen Proben gewählt.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Erste Datenerfassung<ol>
		<li>Suchen Sie in der Gerätesteuerungssoftware die Kamera, die die MALDI-ToF MS-Zielplatte und ein Diagramm der Bohrlöcher mit den angezeigten Spaltenbuchstaben und Zeilennummern anzeigt. Klicken Sie auf die MALDI-ToF-MS-Vertiefung, die das Kationen-Analyt-Matrix-Gemisch enthält , um es für die Datenerfassung auszuwählen.</li>
		<li>Stellen Sie den Massenerfassungsbereich in der Gerätesteuerungssoftware auf einen breiten Bereich von 500-20000 Da ein, um sicherzustellen, dass die erwartete Masse des Analyten vollständig erfasst wird. Verwenden Sie den Cursor, um den Bereich etwa 2x unter und über der erwarteten Masse des Analyten nach einer ersten Erfassung einzustellen.</li>
		<li>Datenerfassung<ol>
			<li>Drücken Sie die Start-Taste an der Gerätesteuerungssoftware, um die MALDI-ToF MS-Datenerfassung zu starten.</li>
			<li>Drücken Sie Stopp oder lassen Sie die MALDI-ToF MS-Erfassung automatisch abschließen.</li>
			<li>Klicken Sie auf Hinzufügen , um das MALDI-ToF-MS-Einzelspektrum als Summenspektrumpuffer hinzuzufügen. HINWEIS: Der MALDI-ToF MS-Einzelspektrumpuffer speichert ein individuelles MALDI-ToF-Massenspektrum, und der Summenspektrumpuffer sammelt Daten aus mehreren Erfassungen, wodurch die Signalintensität erhöht wird.</li>
			<li>Positionieren Sie den MALDI-ToF MS-Laser neu, indem Sie den Kamera-Feed anzeigen, und klicken Sie auf Eine beliebige Stelle innerhalb desselben ausgewählten Wells , um den Laser an eine neue Position zu bewegen.</li>
			<li>Wiederholen Sie die MALDI-ToF MS-Erfassungen, um dem Summenpuffer einzelne MALDI-ToF MS-Einzelspektren hinzuzufügen. Wiederholen Sie die Schritte 2.2.3.1 bis 2.2.3.4, bis die Ergebnisse der MALDI-ToF-MS zufriedenstellend sind.</li>
			<li>Bewerten Sie das MALDI-ToF-Massenspektrum auf Auflösung und Basisrauschen. Wenn das MALDI-ToF-MS-Spektrum eine hohe Auflösung und minimales Grundlinienrauschen aufweist, fahren Sie mit dem Kalibrierungsschritt fort. Wenn nicht, sollten Sie die Datenerfassungsmethode optimieren (z. B. durch Anpassen der Laserleistung, der Detektorverstärkung oder der Einstellungen für die Extraktion gepulster Ionen).</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Optimierung der Datenerfassung (siehe Abbildung 1)<ol>
		<li>Passen Sie die MALDI-ToF MS-Laserleistung, die Detektorverstärkung und die Extraktion gepulster Ionen nacheinander an, um die Auflösung zu verbessern und/oder das Hintergrundrauschen zu verringern</li>
		<li>Um die MALDI-ToF MS-Methode zu duplizieren, kopieren Sie die MALDI-ToF MS LP- oder RP-Methode, und fügen Sie sie unter einem neuen Namen ein. Öffnen Sie die eingefügte MALDI-ToF MS-Methodendatei, die erstellt wurde, und benennen Sie die Datei um.</li>
		<li>Erfassen Sie ein anfängliches MALDI-ToF-Massenspektrum, indem Sie alle Schritte in Abschnitt 2.2 für die erste Datenerfassung im Abschnitt Datenerfassung ausführen. Zoomen Sie in eine Reihe von Peaks des MALDI-ToF-MS mit der höchsten Intensität, um die Auflösung und das Basisrauschen in der Gerätesteuerungssoftware zu bewerten.</li>
		<li>Optimierung der Akquisition<ol>
			<li>Passen Sie die Leistung des MALDI-ToF MS-Lasers an<ol>
				<li>Beginnen Sie mit einer niedrigen MALDI-ToF MS-Laserleistung von ~ 4% und befolgen Sie die Schritte 2.2.3.1 und 2.2.3.2 für die erste Datenerfassung, um die Datenerfassung zu starten und zu stoppen.</li>
				<li>Beobachten und vergleichen Sie die Auflösung und das Basisrauschen des MALDI-ToF-MS-Einzelpuffers mit dem Anfangsspektrum im Summenpuffer.</li>
				<li>Erhöhen Sie die Leistung des MALDI-ToF MS-Lasers in Schritten von 2 % bis 10 %, um die Ionisation zu verbessern. Führen Sie die Schritte 2.2.3.1 und 2.2.3.2 für die erste Datenerfassung aus, um die Datenerfassung nach jedem Inkrement zu starten und zu stoppen.</li>
				<li>Wählen Sie die niedrigste Laserleistung, die hochintensive Spitzen mit minimalem Rauschen liefert. HINWEIS: Wenn die Leistung des MALDI-ToF MS-Lasers 50 % und mehr beträgt, besteht eine erhöhte Wahrscheinlichkeit einer Probenfragmentierung.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Optimieren Sie den Durchmesser des MALDI-ToF MS-Lasers<ol>
				<li>Passen Sie auf der Registerkarte "Detektor" den Durchmesser des MALDI-ToF MS-Lasers an, um die Einstellungen "Mittel", "Groß" und "Ultra" zu testen. Führen Sie die Schritte 2.2.3.1 und 2.2.3.2 für die erste Datenerfassung aus, um die Datenerfassung zu starten und zu stoppen.</li>
				<li>Beobachten und vergleichen Sie die Auflösung und das Basisrauschen des MALDI-ToF-MS-Einzelpuffers mit dem Anfangsspektrum im Summenpuffer.</li>
				<li>Wählen Sie den MALDI-ToF MS-Laserdurchmesser aus, der eine optimale Auflösung bei minimalem Grundlinienrauschen bietet. HINWEIS: Der MALDI-ToF MS-Laserdurchmesser steuert den Durchmesser des Laserstrahls.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Passen Sie die Verstärkung des MALDI-ToF MS-Detektors an<ol>
				<li>Erhöhen oder verringern Sie die Verstärkung des MALDI-ToF MS-Detektors in kleinen Schritten. Führen Sie die Schritte 2.2.3.1 und 2.2.3.2 für die anfängliche Datenerfassung aus, um die Datenerfassung bei jeder Erhöhung oder Abnahme der Verstärkung des MALDI-ToF-MS-Detektors zu starten und zu stoppen.</li>
				<li>Beobachten Sie die Signalintensität und -auflösung der MALDI-ToF-Massenspektren auf der Gerätesteuerungssoftware bei jeder Einstellung des MALDI-ToF MS-Einzelpuffers und des Anfangsspektrums im Summenpuffer.</li>
				<li>Behalten Sie die Verstärkung des MALDI-ToF MS-Detektors bei, die die beste Intensität und gute Signalauflösung bietet.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Modifizieren Sie die MALDI-ToF MS-Extraktion mit gepulsten Ionen<ol>
				<li>Stellen Sie die gepulste Ionenextraktion des MALDI-ToF MS in Schritten von 10 ns ein. Führen Sie die Schritte 2.2.3.1 und 2.2.3.2 für die Erstdatenerfassung aus, um die Datenerfassung für jede Erhöhung oder Verringerung der Detektorverstärkung zu starten und zu stoppen.</li>
				<li>Bewerten, wie die Änderungen der gepulsten Ionenextraktion die Auflösung des MALDI-ToF-MS-Signals verbessern. HINWEIS: Die gepulste Ionenextraktion MALDI-ToF MS ist definiert als Zeitverzögerung zwischen der Laserionisation. Durch Erhöhen oder Verringern der Pulsionenextraktion bleiben Ionen unterschiedlicher Energien entweder kürzer oder länger im elektrischen Feld. Die längere Zeit kann es Analyten gleicher Masse und positiv geladener Ionen, die zu leicht unterschiedlichen Zeiten abtragen, ermöglichen, vollständig auf die gleiche Geschwindigkeit zu beschleunigen wie Analytionen derselben Masse, wenn die Spannung angelegt wird. Dies kann verwendet werden, um die Auflösung zu erhöhen und das Hintergrundrauschen des Signals25 zu verringern.</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Sobald die optimale Auflösung und das höchste Signal-Rausch-Verhältnis erreicht sind, speichern Sie die optimierte MALDI-ToF MS-Methodendatei für die aktuelle und zukünftige Verwendung.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>MALDI-ToF MS-Kalibrierung<ol>
		<li>Erfassen Sie das Kalibrierungs-MALDI-ToF-Massenspektrum, indem Sie die Kalibrierprobe auf der Zielplatte auswählen und alle Schritte in Abschnitt 2.2 für die erste Datenerfassung befolgen<ol>
			<li>Greifen Sie auf die Kalibrierungsreferenzpunkte zu. Navigieren Sie zur Registerkarte "Kalibrierung" in der Gerätesteuerungssoftware. Öffnen Sie die entsprechende Massenkontrollliste, die dem verwendeten Kalibranten entspricht.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Gleichen Sie die Kalibrierungsspitzen des MALDI-ToF-Massenspektrums mit den Referenzmassen in der Massenkontrollliste ab.<ol>
			<li>Wählen Sie in der Massenkontrollliste die Masse aus, die dem ersten Kalibrierungspeak im MALDI-ToF-Massenspektrum entspricht. Das MALDI-ToF-Massenspektrum zoomt automatisch auf den ausgewählten Kalibrantpeak.</li>
			<li>Stellen Sie den Referenz-Peak ein, indem Sie links neben dem Calibrant-Signal klicken. Der Gipfel wird ausgewählt.</li>
			<li>Wählen Sie Anwenden , um das Kalibrantsignal als Referenzmasse in der Massenkontrollliste festzulegen.</li>
			<li>Wiederholen Sie diesen Vorgang für alle zusätzlichen Kalibrierungspeaks. Wählen Sie die nächste interessierende Masse aus der Massensteuerungsliste aus, richten Sie den entsprechenden Kalibranten-Peak aus und wenden Sie die Referenzeinstellung an.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Probenaufnahme für kalibrierte Polymeranalyten<ol>
		<li>Suchen Sie die Vertiefung, die die Kation:Analyt:Matrix-Gemischvertiefung enthält, und wählen Sie sie in der Gerätesteuerungssoftware aus.</li>
		<li>Führen Sie die Datenerfassung durch, indem Sie alle Schritte in Abschnitt 2.2 bei geöffneter optimierter und kalibrierter Methode ausführen.</li>
		<li>Fügen Sie einen geeigneten Dateinamen hinzu und speichern Sie das kalibrierte MALDI-ToF-Massenspektrum des Analyten für die weitere Analyse.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Entfernen Sie die MALDI-ToF MS-Zielplatte mit der Gerätesteuerungssoftware. Reinigen Sie die MALDI-ToF MS Zielplatte</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68455/68455fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Entscheidungsbaum für die Optimierung der Instrumentenmethode. Dieser Leitfaden soll Anfängern helfen, die Parameter der Instrumentenmethode systematisch zu optimieren. Beginnen Sie mit den Standard- oder Anfangseinstellungen und passen Sie jeweils einen Parameter an, indem Sie ihn je nach beobachteten Verbesserungen entweder erhöhen oder verringern. Fahren Sie dann in der Richtung fort, die (1) die Spitzenintensität, (2) die Basisqualität (geringes Rauschen) und (3) eine schmale Peak- und Isotopenauflösung verbessert. Dieser Ansatz hilft dabei, optimale Bedingungen für zuverlässige und qualitativ hochwertige Spektren zu identifizieren. Wenn die Polymerprobe im Reflektormodus nicht ionisiert oder kein brauchbares Spektrum erzeugt, wechseln Sie in den linearen Modus und verwenden Sie denselben Entscheidungsbaum, um die Parameter zu optimieren. Beachten Sie, dass der lineare Modus oft zu breiteren Peaks und begrenzter oder keiner Isotopenauflösung führt, aber er kann für Polymere mit höherer Masse oder Polymere, die im Reflektormodus die Ionisation verlieren können, wirksam sein. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68455/68455fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
3. Datenanalyse und -interpretation
<ol>
	<li>Öffnen Sie die MALDI-ToF MS Datenanalysesoftware und laden Sie das MALDI-ToF MS Analyt-Probenspektrum.</li>
	<li>Wählen Sie die richtige MALDI-ToF MS-Verarbeitungsmethode für die Analytproben. Hier wiesen alle Proben eine Isotopenauflösung auf, und der erste Peak wurde für alle Peaks mit der gewählten MALDI-ToF MS-Verarbeitungsmethode ausgewählt. HINWEIS: Die Verarbeitungsparameter von MALDI-ToF MS können für synthetische Polymerproben angepasst werden. So wurde beispielsweise im Rahmen einer technischen Schulung durch den Instrumententechniker von MALDI-ToF MS ein MALDI-ToF MS-Verarbeitungsverfahren für Polymere entwickelt. Ein MALDI-ToF-MS-Verfahren zur Verarbeitung der durchschnittlichen Massenmasse wurde von Payne et al. für spezifische Anwendungen entwickelt16. Wenden Sie sich an das polymertechnische Team des MALDI-ToF MS-Herstellers, um Informationen und Ratschläge zur Bearbeitung der MALDI-ToF MS-Verarbeitungsmethode zu erhalten.</li>
	<li>Finden Sie Peaks mit der Analysesoftware MALDI-ToF MS.</li>
	<li>Vergleichen Sie die theoretische und experimentelle Polymermasse<ol>
		<li>Notieren Sie die theoretische Polymermasse. Zeichnen Sie die erwartete Makromolekülstruktur, einschließlich des Kationens, in einer chemischen Zeichensoftware. Öffnen Sie das Analysefenster in der chemischen Zeichensoftware und zeichnen Sie die theoretische Masse auf.<ol>
			<li>Monodisperse Makromoleküle: Erfassen Sie die genaue Masse und das Molekulargewicht des Makromoleküls, indem Sie die Struktur und das Kation zusammen auswählen.</li>
			<li>Niedrige, mittlere und hochdisperse Polymere: Wählen Sie für die Wiederholungsmasse der Einheit nur das Polymer-Rückgrat aus, um die Masse der Wiederholungseinheit aufzuzeichnen. Für die Gesamtmasse eines angegebenen n-mers setzen Sie die Wiederholungseinheitsnummer auf eine Masse innerhalb des MALDI-ToF MS-Spektrumbereichs, der in der MALDI-ToF MS-Analysesoftware angezeigt wird. Wählen Sie die gesamte Polymerstruktur aus, einschließlich der Kationen- und Endgruppen, um die Masse eines angegebenen n-mers aufzuzeichnen.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Vergleichen Sie die aufgezeichnete theoretische Masse mit der beobachteten Masse aus dem MALDI-ToF-MS-Spektrum.<ol>
			<li>Für die Berechnung der Gesamtmasse monodisperser Makromoleküle befolgen Sie die unten beschriebenen Schritte.<ol>
				<li>Vergrößern Sie den Peak mit der höchsten Intensität im MALDI-ToF-MS-Spektrum und stellen Sie sicher, dass die Ansicht einen Massenbereich von mindestens 2x unter und über der theoretischen Masse umfasst.</li>
				<li>Vergleichen Sie die theoretische Masse mit der beobachteten Masse im MALDI-ToF-Massenspektrum. Wenn die Differenz weniger als 0,100 Da beträgt, ist die erwartete monodisperse Makromolekülmasse wahrscheinlich genau.</li>
				<li>Untersuchen Sie das MALDI-ToF-MS-Spektrum auf zusätzliche Peaks, die auf das Vorhandensein unerwarteter Strukturen hinweisen könnten.</li>
				<li>Wenn Abweichungen festgestellt werden, bewerten Sie mögliche strukturelle Abweichungen. Überprüfen Sie das Reaktionsschema und berechnen Sie die Massen alternativer Strukturen zum Vergleich.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Führen Sie für die wiederholte Berechnung der Masseneinheit von Polymeren mit niedriger, mittlerer und hoher Dispergierung die unten beschriebenen Schritte aus.<ol>
				<li>Wählen Sie zwei Peaks aus, die durch die Masseneinheit der Wiederholungseinheit im MALDI-ToF-MS-Spektrum getrennt sind und die höchste Intensität aufweisen, und zoomen Sie hinein.</li>
				<li>Subtrahieren Sie für jedes Paar benachbarter Peaks die beobachtete Masse des Peaks mit der höheren Masse vom Peak mit der unteren Masse, um die Masseneinheit der Wiederholungseinheit zu berechnen. Wiederholen Sie diesen Vorgang für den nächsten Satz von Peaks, um die Konsistenz der Wiederholungseinheitsmasse zu bestätigen.</li>
				<li>Vergleichen Sie die berechnete Wiederholungseinheitsmasse mit der theoretischen Wiederholungseinheitsmasse. Wenn die beobachteten und theoretischen Werte übereinstimmen und konsistente Massenunterschiede aufweisen, ist die Wiederholungsmasse des Polymers wahrscheinlich korrekt.</li>
			</ol>
			</li>
			<li>Führen Sie für die Gesamtmasse eines angegebenen n-mers von niedrig-, mittel- und hochdispersen Polymeren die unten beschriebenen Schritte aus.<ol>
				<li>Vergrößern Sie den Peak auf dem MALDI-ToF-Massenspektrum, der der theoretischen Gesamtmasse entspricht, sowie Peaks, die eine Wiederholungseinheit darüber und darunter liegen.</li>
				<li>Vergleichen Sie die theoretische Masse mit der beobachteten Masse im MALDI-ToF-Massenspektrum. Wenn die Differenz weniger als 0,100 Da beträgt, sind die erwarteten Endgruppen wahrscheinlich genau.</li>
				<li>Untersuchen Sie das MALDI-ToF-Massenspektrum auf zusätzliche Peaks, die auf unerwartete Strukturen hindeuten könnten.</li>
				<li>Wenn Abweichungen festgestellt werden, bewerten Sie alternative Endgruppen oder strukturelle Abweichungen. Überprüfen Sie das Reaktionsschema und berechnen Sie die Massen für mögliche alternative Endgruppen oder zyklische Strukturen.</li>
			</ol>
			</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

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</ol>

<table><tbody><tr><td>1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidhydrochlorid</td><td>TCI-Chemikalien</td><td>Nr. D1601</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/D1601</td></tr><tr><td>1,1,1-Tris(hydroxymethyl)propan</td><td>Millipore Sigma</td><td>148083</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/148083?srsltid=AfmBOoqaMzcy1xravp1h2QE 0myfY5gjuEBfOIv2o882Wb _xcB4Ol4CMW</td></tr><tr><td>1,5,7-Triazabicyclo[4.4.0]dec-5-en</td><td>Millipore Sigma</td><td>345571</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/345571?srsltid=AfmBOooLQXIhWaMnO63nE xu-Y5MJoJID6RJiby0NXyu DHOxXYjle_kMT</td></tr><tr><td>1,6-Hexanedithiol 98% (HDT)&nbsp;</td><td>TCI</td><td>Nr. H0334</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/H0334</td></tr><tr><td>2-(4-hydroxyphenylazo)benzoesäure) (HABA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>Nr. H5126</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/h5126</td></tr><tr><td>2,2-Bis(hydroxymethyl)propionsäure</td><td>Millipore Sigma</td><td>106615</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/106615?srsltid=AfmBOopCRoa1N_UiDK 56NKhDKdlAN8feUrMxVYhul Muz2en6NYEGIh4b</td></tr><tr><td>2,2-Dimethoxy-2-phenylacetophenon 99% (DMPA)&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>196118</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/196118?srsltid=AfmBOoqVTif6KNwIr6A -bIgnXbkrvWKIUNH6qOsc RseQLNVKi0DMWPb-</td></tr><tr><td>2,5-Dihydroxybenzoesäure (DHB)</td><td>Millipore Sigma</td><td>149357</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/149357</td></tr><tr><td>4-(Dimethylamino)pyridin</td><td>Millipore Sigma</td><td>522821</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/search/522821?focus=products&page=1&perpage= 30& sortieren=Relevanz& Begriff=522821 & Typ=Produkt&nbsp;</td></tr><tr><td>6-Bromhexansäure</td><td>Millipore Sigma</td><td>150452</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/search/6-bromohexanoic-acid?focus=products&page=1 & pro Seite=30& sortieren=Relevanz& term= 6-Bromhexansäure%20säure& Typ=Produkt&nbsp;</td></tr><tr><td>Benzaldehyddimethylacetal</td><td>Millipore Sigma</td><td>226076</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/226076?srsltid= AfmBOorbjP7zD9MO3g5Xk LL3rNZ02PhfkXoRfe3EjRK7 TrqJ-kEOrTCN</td></tr><tr><td>Benzoesäure</td><td>Millipore Sigma</td><td>242381</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/sial/242381?srsltid=AfmBOook_iIcMnwuB3e _j-KetQyyHJ6Qq86jSK8 ZVxC3BorQgkO8Xg5I&nbsp;</td></tr><tr><td>Bruker UltraFlextreme&nbsp;</td><td>Bruker Daltonics</td><td></td><td>https://www.bruker.com/en/products-and-solutions/mass-spectrometry/maldi-tof/ultraflextreme.html</td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Fisher Scientific</td><td>AA32614K7</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/chloroform-acs-99-8-thermo-scientific/AA32614K7 ?searchHijack=wahr& searchTerm= chloroform-acs-99-8-thermo-scientific & searchType=Schnell& passendCatNo =AA32614M6</td></tr><tr><td>Dithranol, BP, 98,5-101% (DT)</td><td>Fisher Scientific</td><td>18-602-270</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/dithranol-bp-98-5-101-spectrum-chemical/18602270</td></tr><tr><td>Ethylen-Brassylat</td><td>Millipore Sigma</td><td>W354309</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/w354309?utm_source=google&utm_medium= CPC& utm_campaign=8692675663& utm _content=86098110623& gad_source= 1& gclid=CjwKCAiApY-7BhBjEiwAQMr rEdJTcKN5TEFkP1uHvRlVign3lwg2cj5 _spBUCrfi6exZ3Ur5sJkARxoCfWsQ AvD_BwE&nbsp;</td></tr><tr><td>Galvinoxyl, freies Radikal</td><td>Millipore Sigma</td><td>G307</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/g307?srsltid= AfmBOopoWGDMXtLk5Erf0rVyl 7j442uyg8rIWkfBjhHZ2z0dDktH3y8-</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>Nr. A456</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-optima-lc-ms-grade-thermo-scientific/A4564</td></tr><tr><td>Palladium, 10% auf Kohlenstoff, Typ 487, trocken</td><td>Fisher Scientific</td><td>AAA1201206</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/palladium-10-carbon-type-487-dry-thermo-scientific-1/AAA1201206#?keyword=palladium%20on%20carbon</td></tr><tr><td>Poly(ethylen&nbsp; Glykol)monomethylether 350&nbsp; Mn&nbsp; (MeO-PEG-OH 360)&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>AA4156022</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/polyethylene-glycol-monomethylether-350-thermo-scientific/AA4156022</td></tr><tr><td>Kaliumtrifluoracetat (KTFA)</td><td>Millipore Sigma</td><td>281883</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/281883</td></tr><tr><td>Propargylalkohol</td><td>Fisher Scientific</td><td>Nr. A10295.0F</td><td>https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A10295.0F?SID=srch-hj-A10295.0F</td></tr><tr><td>Propargylbromid 97 % (80 Gew.-% in Toluol, stabilisiert mit MgO)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AAL1059514</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/propargyl-bromide-97-80-w-w-toluene-stab-magnesium-oxide-thermo-scientific/AAL1059514#?keyword=Propargyl%20bromide%2097%%20(80%%20w/w%20in%20Toluol%20stabilisiert%20mit%20MgO)</td></tr><tr><td>Natriumazid</td><td>Millipore Sigma</td><td>Nr. 2002</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/sial/s2002&nbsp;</td></tr><tr><td>Natriumhydrid 60%ige Dispersion in Mineralöl&nbsp;</td><td>Millipore Sigma</td><td>452912</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/452912?srsltid= AfmBOooZhbCm_qtgKU99922Y91zI qEOWONlEGxjZn0mdSJF2L5hW1uVn</td></tr><tr><td>Natriumtrifluoracetat (NaTFA)</td><td>Oakwood</td><td>MFCD00013217</td><td>https://www.oakwoodchemical.com/ProductsList.aspx?CategoryID=-2&txt Suche=1549& ExtHyperLink=1</td></tr><tr><td>SpheriCal Neat Low Range Kit (250 - 7.500 da)</td><td>Polymer-Fabrik</td><td>PFS-104</td><td>https://www.polymerfactory.com/product-page/spherical-low-range-kit-500-7-500-da</td></tr><tr><td>Tetrahydrofuran (THF)</td><td>Fisher Scientific</td><td>Nr. T427</td><td>https://www.fishersci.com/shop/products/tetrahydrofuran-optima-fisher-chemical-3/T4274#?keyword=tetrahydrofuran%20optima</td></tr><tr><td>trans-2-[3-(4-tert-Butylphenyl)-2-methyl-2-propenyliden]malononitril (DCTB)</td><td>TCI</td><td>Nr. B3635</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/B3635</td></tr><tr><td>&alpha;-Cyano-4-hydroxyzimtsäure (CHCA)</td><td>TCI</td><td>Um 1768</td><td>https://www.tcichemicals.com/US/en/p/C1768</td></tr></tbody></table>

maldi-tof ms-methode zur charakterisierung von synthetischen polymeren mit unterschiedlicher dispersität und endgruppen

MALDI-ToF MS Method for the Characterization of Synthetic Polymers with Varying Dispersity and End Groups

MALDI-ToF MS-Methode zur Charakterisierung von synthetischen Polymeren mit unterschiedlicher Dispersität und Endgruppen

Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-ToF MS) is an effective analytical tool for characterizing synthetic ...

maldi-tof-ms-method-for-characterization-synthetic-polymers-with

Research

Forschung

JoVE Journal

Chemistry

Chemie

Eine schnelle Art und Weise beschrieben, Einblicke in die Struktur der Polysaccharide in einer extrazellulären Matrix zu gewinnen. Die Methode nutzt die Spezifität von Glykosylhydrolasen und die Empfindlichkeit der Massenspektrometrie ermöglicht winzige Mengen von Materialien analysiert werden. Diese Technik ist anpassungsfähig, um direkt auf das Gewebe selbst verwendet werden.

Oligo Messe Profiling (OLIMP) der extrazellulären Polysacchariden

Dithranol (DT, 1,8-Dihydroxy-9 ,10-dihydroanthracen-9-on) wurde zuvor als ein MALDI-Matrix für die Gewebeabbildung für kleine Moleküle berichtet wurde, Protokolle für die Verwendung von DT für die MALDI-Imaging von endogenen Lipiden auf die Hier werden Oberflächen von Gewebeschnitten von Positiv-Ionen-MALDI-MS auf einem ultrahochauflösenden Quadrupol-FTICR Instrument zur Verfügung gestellt.

Dithranol als Matrix für Matrix Assisted Laser Desorption / Ionisation Imaging auf einem Fourier-Transformations-Ionen-Zyklotron-Resonanz-Massenspektrometer

Ein Protokoll für die Synthese und Charakterisierung von Diffusionsbewegung von zyklischen Polymeren auf der Einzelmolekülebene vorgestellt.

Synthese cyclischer Polymere und Charakterisierung ihrer Diffusionsbewegung im geschmolzenen Zustand auf der Einzelmolekülebene

Ein mögliches allgemeines Verfahren zur Synthese von wasserlöslichen multimetallischen peptidischen Arrays, die eine vorgegebene Sequenz von Metallzentren enthalten, wird vorgestellt.

Synthese eines wasserlöslichen Metall-organische Komplexe Array

Hier präsentieren wir ein Protokoll zu erstellen und visualisieren Sekundärstrukturen (zB Fasern, Ringkernarchitekturen und Nanokugeln) aus Schrauben Polycarbodiimide abgeleitet. Die Morphologie sowohl von Rasterkraftmikroskopie (AFM) und Rasterelektronenmikroskopie (SEM) charakterisiert wurde auf molekulare Struktur, die Konzentration und das Lösungsmittel der Wahl abzuhängen gezeigt.

Selbstaufbau Morphologien Gewonnen aus Helical Polycarbodiimid-Copolymere und deren Triazolderivate

Ein Protokoll für die Matrix-assisted Laser Desorption ionisation Zeit des Fluges, die Massenspektrometrie (MALDI-TOF MS) Charakterisierung von synthetischen Polymeren beschrieben wird unter anderem die Optimierung der Probenvorbereitung, spektrale Beschaffung und Analyse von Daten.

Charakterisierung von synthetischen Polymeren Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation Zeit der Massenspektrometrie Flug (MALDI-TOF)

Ziel dieses Protokolls ist es, die Polymerisation mit dynamischen Schwefelbindungen in Polyy (S-divinylbenzol) bei milden Temperaturen (90 ° C) ohne Lösungsmittel zu initiieren. Terpolymere zeichnen sich durch GPC, DSC und 1H NMR aus und testen auf Veränderungen der Löslichkeit.

Synthese von Terpolymeren bei Mildtemperaturen mit dynamischen Schwefelbonds in Poly (S-Divinylbenzene)

Ein Protokoll für die Synthese und Charakterisierung von selbstorganisierten metallorganischen Gerüst-Monoschichten wird unter Verwendung von polymergepfropften, metallorganischen Gerüstkristallen (MOF) erstellt. Das Verfahren zeigt, dass polymergepfropfte MOF-Partikel an einer Luft-Wasser-Grenzfläche selbstorganisiert werden können, was zu gut geformten, freistehenden Monolagenstrukturen führt, wie die Rasterelektronenmikroskopie zeigt.

Synthese und Charakterisierung von selbstorganisierten metallorganischen Gerüstmonolagen unter Verwendung polymerbeschichteter Partikel

Hier stellen wir ein detailliertes Protokoll für die Freisetzung von O-Glykanen aus Muzinen und die anschließende Entsalzung, Permethylierung und Analyse mittels MALDI-TOF-Massenspektrometrie vor.

Profilierung von permethylierten Mucin-O-Glykanen mittels matrixgestützter Laserdesorption/Ionisations-Flugzeit-Massenspektrometrie

Genaue Massenmessung stellt einen wichtigen Schritt bei der Untersuchung von Proteinen. Matrix-unterstützte Laserdesorption / Ionisation (MALDI) Massenspektrometrie (MS) für eine solche Bestimmung verwendet werden, und deren wesentliche Vorteil ist die Toleranz zu Salzen, Detergenzien und Verunreinigungen. Hier veranschaulichen wir eine zugängliche Ansatz für die Analyse von Proteinen, die größer als 100 kDa durch MALDI-MS.

Matrix-assistierte Laser Desorptions / Ionisations-Flugzeit (MALDI-TOF)-Massenspektrometrie-Analyse von intakten Proteinen mit mehr als 100 kDa

Lernen Sie die MALDI-ToF MS-Methode zur Charakterisierung synthetischer Polymere mit unterschiedlicher Dispersität und Endgruppen. Dieses Protokoll ermöglicht präzise Massenspektrometrie-Analysen für die Polymerchemie.

MALDI-ToF MS-Methode zur Charakterisierung von synthetischen Polymeren mit unterschiedlicher Dispersität und Endgruppen

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