Este artículo demuestra procedimientos quirúrgicos de reflujo gastroesofágico con ratones. Estos modelos son herramientas útiles para la investigación sobre los mecanismos y el tratamiento de la enfermedad por reflujo gastroesofágico y potencialmente el esófago de Barrett y el adenocarcinoma de esófago.
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Artículo de método
Modelos quirúrgicos de reflujo gastroesofágico con ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
Se ha reportado que múltiples procedimientos quirúrgicos inducen reflujo gastroesofágico en animales. En este documento, reportamos tres modelos quirúrgicos con ratones que apuntan a inducir reflujo de contenido gástrico, contenido duodenal o contenido mixto. Los procedimientos quirúrgicos y los principios generales han sido descritos en detalle. Un investigador con experiencia quirúrgica debería ser capaz de dominar la técnica después de un corto período de práctica. Después de la cirugía, la mayoría de los ratones pueden sobrevivir y desarrollar esofagitis por reflujo similar a la de los humanos. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que las diferencias histológicas entre el esófago de ratón y humano son las limitaciones inherentes de estos modelos quirúrgicos. Si se usan para la investigación sobre el esófago de Barrett y el adenocarcinoma, estos procedimientos pueden necesitar combinarse con modificaciones genéticas.
Introducción
La enfermedad por reflujo gastroesofágico (ERGE) es un trastorno crónico causado por la exposición prolongada del esófago distal a contenidos gástricos o gastroduodenales1. La exposición prolongada a estos reflujos nocivos deteriora las defensas intrínsecas del epitelio esofágico y, por lo tanto, da lugar a esofagitis2. El esófago de Barrett surge en el contexto del reflujo crónico y es una lesión premaligna con mayor riesgo de adenocarcinoma esofágico3,4. A pesar de la importancia clínica, los mecanismos de la ERGE, el esófago de Barrett y el adenocarcinoma no se han comprendido bien.
Los modelos animales ....
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Protocolo
Todos los experimentos con animales han sido aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucional.
1. Preparación del ratón
- Utilice ratones durante ~ 20 g en el peso corporal o por encima de ~ 6 semanas de edad para la cirugía.
- Antes de la cirugía, los ratones dar un laboratorio chow y agua ad libitum y mantener en un ciclo de luz-oscuridad de 12:12 h.
- Afeitarse el área quirúrgica con una cortadora de cabello. Anestesiar los ratones por inyección intraperitoneal de 80 mg / kg de ketamina y 12 mg / kg de xilazina. Esta dosis pone ratones en el sueño en unos pocos minutos y proporciona a....
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Resultados
La mayoría de los ratones (> 95%) pueden sobrevivir a la cirugía. Durante el período perioperatorio, las principales causas de muerte son la sobredosis de anestésicos, sangrado y razones desconocidas.
Cuatro semanas después de la cirugía,> 90% ratones con reflujo gástrico o reflujo mixta y> 80% los ratones con el reflujo duodenal pueden sobrevivir. Durante este período, los ratones mueren principalmente de estenosis esofágica y la incapacidad para comer. Estos ratones muestran signo.......
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Discusión
Varios modelos quirúrgicos se han establecido para imitar gástrica, duodenal y reflujo mixto en roedores. Estos tres procedimientos descritos aquí son adecuados para los experimentos a largo plazo con tasas razonables de supervivencia postoperatoria. Un investigador con experiencia quirúrgica debe ser capaz de captar la técnica después de un corto período de práctica.
El sangrado puede ser el resultado de la inyección intraperitoneal de anestésicos antes de la cirugía, laceración del hígado .......
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Divulgaciones
Uno de los autores (XC) recibió financiación que fue proporcionada por Takeda Pharmaceutical Company Ltd, que apoya la investigación básica relacionada con la enfermedad por reflujo gastroesofágico. Ninguno de los reactivos o instrumentos utilizados en este artículo es producido por esta empresa.
Agradecimientos
Contamos con el apoyo de subvenciones de investigación de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (NO. 81400590), los Institutos Nacionales de Salud (U54 CA156735) y Takeda Pharmaceutical Company Ltd. (MA-NC-D-156).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Dumont #1 Forceps Dumostar Tip | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Clip Applying Forceps 5.5" | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Bonn Scissors 3.5" Straight 15 mm Sharp/Sharp Tungsten Carbide Blades | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Operating Scissors 5.5" Straight Sharp/Sharp SureCut | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| 4-0 Silk Black Braid 100 Yard Spool | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Surgeon's Needle 1/2 Circle Cutting Edge Size 12 (25 mm Chord Length) Pack 12 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Halsey Needle Holder 5" Smooth | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mm | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0 | Ethicon US, LLC | ||
| Ringer's solution | Henry Schein, Inc. | ||
| ketamina | Henry Schein, Inc. | ||
| xilazina | Henry Schein, Inc. |
Referencias
- Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
- Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....
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Reimpresiones y permisos
