Name: Factor de crecimiento-Coated colocación de bolas de explantes cerebro anterior dorsal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-01-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 7 s
Description: Aprende a colocar perlas recubiertas con factores de crecimiento en explantes de corteza cerebral dorsal anterior. Este método permite inducir expresión génica espacialmente restringida en tejido neural en desarrollo para estudios de neurociencia.

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Los autores no tienen nada que revelar.

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Growth Factor-Coated Bead Placement on Dorsal Forebrain Explants

Este video muestra dos métodos para la preparación y la colocación de cuentas, que han sido recubiertos con factor de crecimiento, en los explantes de la corteza cerebral en desarrollo. Estas cuentas pueden utilizarse para inducir la expresión de genes restricción espacial en el desarrollo del tejido neural, como explantes cerebro anterior. Métodos se dan para el uso de ambos Affi-Gel abalorios y cuentas de heparina Acryllic.

Factor de crecimiento-Coated colocación de bolas de explantes cerebro anterior dorsal

Entonces, estas son el primer tipo de perlas que usaré. Son perlas de gel azul. Son suaves.Así que necesito usar una pipeta de vidrio agrupada en el extremo de una pipeta de boca para colocar estas perlas sobre las X. El segundo tipo de perla que demostraré son perlas de acrílico con heparina. Son un tipo rígido de perla, y colocaré estas perlas sobre explantes X utilizando una aguja de tungsteno. Estos son los tubos capilares de vidrio que primero fundiré usando el mechero Bunsen.Luego los jalaré para crear una punta más fina. Así que sostengo el tubo capilar en el centro de la llama y lo giro mientras el tubo se derrite. Puedo sentir que se vuelve blando.Lo sacaré de la llama y luego lo estiraré. Voy a rayar una línea a través del tubo capilar con este bolígrafo con punta de diamante para poder hacer un corte recto y limpio. Luego puliré los extremos con la llama para limpiarlos.Voy a pasar el capilar por la llama para pulir el extremo y reducir la abertura, de modo que pueda capturar una perla en lugar de permitir que esta atraviese el capilar. Es importante tener en cuenta que no se debe mantener el tubo capilar en la llama durante mucho tiempo. En realidad, es un paso muy rápi

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Investigación

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Biología

Una variedad de factores de crecimiento y proteínas interactúan para inducir a las células para asumir los destinos diferentes de células durante el desarrollo. Aquí se demuestra el uso de una preparación para hacer frente a ovo las posibles interacciones entre diferentes proteínas en el desarrollo mediante la colocación de las cuentas de E2.5 embriones de pollo.

La colocación de crecimiento recubierto Factor-bolas en los embriones tempranos de la etapa de pollo

Demostramos cómo diseccionar y la cultura de pollo ganglio statoacoustic E4 y E6 explantes de la médula espinal. Los explantes se cultivaron en condiciones libres de suero en geles de colágeno en 3D durante 24 horas. La capacidad de respuesta neuritas se prueba con el factor de crecimiento medio suplementado y con recubrimiento de proteínas cuentas.

La disección del ganglio y Cultura polluelo Statoacoustic y explantes médula espinal en geles de colágeno para ensayos neurite

Los cultivos neuronales de explantes de<em&gt; Xenopus laevis</em

Este video muestra el modelo de coculturación de un explante de ganglio de raíz dorsal y células de Schwann. En condiciones de cocultivo, el ácido ascórbico promueve la diferenciación de las células de Schwann en formas mielinizantes. Las células de Schwann mielinizantes envuelven los axones varias veces para crear una vaina de mielina, que es esencial para la función nerviosa.

Co-cultivo de un explante de ganglios de raíz dorsal con células de Schwann para la mielinización de neuronas

Este protocolo describe un procedimiento de explante mejorada que...

Ex utero electroporación y explantes enteros hemisferio: un método simple Experimental de Estudios del Desarrollo Cortical Temprana

Neuronas embrionarias nacen en la zona ventricular del tubo neural, pero migran a alcanzar los objetivos adecuados. Branchiomotor facial (FBM), las neuronas son un modelo útil para estudiar la migración neuronal. Este protocolo describe la cultura wholemount ex vivo de hindbrains embrión de ratón para investigar los mecanismos que regulan la migración FBM.

Ratón Rombencéfalo<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura para el Estudio de la Migración facial Branchiomotor Neurona

Mediante el injerto de perlas empapadas en factores de crecimiento o inhibidores específicos de las vías de señalización en embriones en desarrollo, es posible probar directamente sus efectos in vivo. En este protocolo, las perlas se injertan en la yema de la extremidad para determinar los efectos de estas moléculas en la expresión génica y la transducción de señales.

Injerto de Cuentas en desarrollo Miembros de embrión de pollo para identificar señales de transducción Pathways afectan la Expresión Génica

En los embriones de Xenopus, las células del techo del blastocelo son pluripotentes y pueden programarse para generar varios tejidos. Aquí, describimos los protocolos para usar explantes de techo de blastocoel de anfibios como un sistema de ensayo para investigar las características clave in vivo e in vitro del desarrollo neuronal temprano.

Celular-como Stem<em&gt; Xenopus</em&gt; Embrionarias explantes para Estudiar Características Temprana del Desarrollo Neural<em&gt; In Vitro</em&gt; Y<em&gt; En Vivo</em

La transición epitelial a mesenquimal (EMT) permite que los cánceres se vuelvan invasivos. Para investigar la EMT, se describe un modelo in vitro basado en células madre neurales (NSC) desprovisto de suero y enzimas. Este sistema estandarizado permite la evaluación cuantitativa y cualitativa de la migración celular, la expresión génica y proteica. El modelo es adecuado para el descubrimiento de fármacos.

Un modelo enzima y Cultura Neural Stem Cell libre de suero para la EMT Investigación Adecuado para el descubrimiento de fármacos

Aquí presentamos un sistema de cultivo monocapa mixto ex-vivo para el estudio de la migración de células de glioma humano (hGC) en tiempo real. Este modelo proporciona la capacidad de observar interacciones entre hGCs y axones mielinados y no mielinizados dentro de una cámara compartimentada.

Monitoreo en tiempo real de la migración de células de glioma humano en cocultivos de axón-oligodendrocitos de ganglios de raíz dorsal

Aprende a colocar perlas recubiertas con factores de crecimiento en explantes de corteza cerebral dorsal anterior. Este método permite inducir expresión génica espacialmente restringida en tejido neural en desarrollo para estudios de neurociencia.

Factor de crecimiento-Coated colocación de bolas de explantes cerebro anterior dorsal

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