Apareamiento y estadificación de los huevos: un método para generar embriones y clasificarlos por etapa de desarrollo

0 views • 2:52 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Comience con un tanque de apareamiento, un tanque con un inserto extraíble que permite que los huevos caigan. Agregue dos peces adultos machos y tres hembras a un tanque de apareamiento dividido por la noche antes de la recolección de embriones para aclimatarse entre sí durante la noche.

A la mañana siguiente, transfiera los peces a un nuevo tanque de apareamiento que contenga agua del sistema y retire el divisor. Espere de 15 a 30 minutos para que los peces tengan tiempo de aparearse y desovar.

Ahora recoge los embriones y guárdalos en una placa de Petri que contenga el medio embrionario de Hank. Cultívalos a 28,5 grados centígrados durante todo el protocolo. Examina la morfología de los embriones bajo un microscopio de disección.

Observará varias características del desarrollo. La escisión del blastodisco da lugar a múltiples células. El blastodermo toma la forma de una copa invertida sobre la célula vitelita. Los segmentos del mesodermo paraxial se desarrollan en la parte dorsal del embrión y así sucesivamente.

Más allá de las 24 horas posteriores a la fertilización, simplemente clasifique los embriones por la longitud total del cuerpo. En el protocolo de ejemplo, configuraremos el apareamiento de peces reporteros mCherry transgénicos y clasificaremos los embriones resultantes.

- Para empezar, cultivar embriones hasta los tres meses de edad, que es la madurez reproductiva. Separe dos peces machos adultos y tres hembras de la cepa deseada en tanques de apareamiento divididos de agua dulce del sistema la noche anterior a la recolección de embriones. A la mañana siguiente, después de que se enciendan las luces, retire el divisor y permita que los peces se apareen naturalmente hasta que se observen embriones en el fondo del tanque.

Recoja los embriones en intervalos de 30 minutos y separe las placas de Petri del medio embrionario hasta que se recoja el número deseado. Para estadificar los embriones, cultícelos en grupos de 50 a 75 por placa de Petri de 10 centímetros para promover un tiempo de desarrollo constante de todos los embriones. Luego mantenga las placas a 28,5 grados centígrados.

Mida la edad del embrión utilizando el número de somitas después de la segmentación hasta aproximadamente 24 horas después de la fertilización, o HPF, y separe los embriones en función de la edad de desarrollo.

13:01

Utilización de hojas de luz de microscopía de fluorescencia a la imagen de ojo de pez cebra Desarrollo

Related Videos

0 Views

10:38

Generación de Parabiotic embriones de pez cebra por fusión quirúrgica de Desarrollar blástulas

Related Videos

0 Views

08:55

Visualización de la actividad eléctrica celular en embriones tempranos de pez cebra y tumores

Related Videos

0 Views

08:22

La recolección y preparación de Drosophila Los embriones de registro electrofisiológico y otros procedimientos

Related Videos

0 Views

13:48

La disección en vivo de Drosophila Los embriones: métodos simplificados para la detección colecciones mutantes tinción con anticuerpos

Related Videos

0 Views

11:02

Ensayo de inmunoprecipitación de la cromatina de los genes específicos de tejido utilizando etapa temprana de embriones de ratón

Related Videos

0 Views

11:56

Generación de ratones derivados de células madre pluripotentes inducidas

Related Videos

0 Views

08:43

Deficitaria y en el enfoque de ganancia de función de investigar la célula destino temprano Determinantes de preimplantación embriones de ratón

Related Videos

0 Views

11:19

La manipulación de ploidía de embriones de pez cebra con el Heat Shock Treatment 2

Related Videos

0 Views

10:35

Generación de bibliotecas de captura de conformación de genoma cromatina desde etapas bien tempranas embriones de Drosophila

Related Videos

0 Views

Last updated: 11 July 2026