Evaluación del enjambre bacteriano mediante una placa inhibidora de gradiente

0 views • 2:08 min • September 26th, 2025

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Tome una placa de enjambre degradada con agar de doble capa. La capa inferior, que contiene un inhibidor, se vertió para crear un gradiente del inhibidor.

La placa contiene pocillos espaciados isométricamente para proporcionar un espacio apropiado para el enjambre bacteriano o la migración colectiva, evitando superposiciones de enjambres.

Inocular los pocillos con un cultivo bacteriano e incubar la placa.

Bajo bajas concentraciones de inhibidores, las bacterias coordinan su movimiento flagelar, iniciando la migración colectiva o el enjambre.

Bajo altas concentraciones de inhibidores, el inhibidor suprime la expresión de genes relacionados con flagelos.

Esto da como resultado un movimiento flagelar limitado, lo que lleva a una motilidad de enjambre restringida.

Imagen de la placa bajo luz blanca a intervalos regulares para capturar el patrón de enjambre.

Durante la obtención de imágenes, ajuste el tiempo de exposición para mejorar el brillo de los enjambres.

Modifique la configuración del umbral para minimizar la interferencia de la luz de fondo y aumentar el contraste.

Guarde la imagen para su posterior análisis del efecto de la concentración de inhibidores en el enjambre bacteriano.

Agregue 80 microlitros del cultivo de crecimiento nocturno en cada pocillo. Saque las placas de enjambre de la incubadora una a la vez cada 12 horas y colóquelas en el sistema de imágenes de gel.

Seleccione el modo de imagen de gel, exponga la placa de enjambre a la luz blanca y ajuste la distancia focal para obtener una vista clara de los enjambres. Mejore el brillo de los enjambres para una observación precisa ajustando el tiempo de exposición a 300 milisegundos. Ajuste el umbral para minimizar la interferencia de la luz de fondo.

Guarde el archivo de imagen para su posterior análisis.

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Preparación, Imaging, y cuantificación de la superficie bacteriana Motilidad ensayos

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Last updated: 27 June 2026