Evaluación de la virulencia bacteriana utilizando el ensayo de toxicidad líquida de C. elegans

0 views • 2:05 min • February 26th, 2026

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Toma una placa multipozo que contiene suspensiones de una bacteria no patógena, que sirve como control, y varias cepas de bacterias patógenas para evaluar su virulencia relativa.

Las bacterias están suspendidas en un medio con pocos nutrientes para evitar el sobrecrecimiento y para simular un entorno propicio para la infección.

Añadir gusanos C. elegans en estadio L4 a cada pozo e incubar la placa bajo agitación continua para mejorar el contacto entre las bacterias y las lombrices.

Los gusanos se alimentan de las bacterias, que entran en su tracto intestinal y lo colonizan.

Las bacterias patógenas liberan toxinas que dañan los tejidos intestinales, lo que conduce a una toxicidad sistémica y, eventualmente, a la muerte de los gusanos.

Tras la incubación, cuenta los gusanos vivos en cada pozo y genera un gráfico para evaluar sus tasas de supervivencia.

Las diferencias en las tasas de supervivencia de los gusanos reflejan la virulencia relativa de cada cepa bacteriana.

Tras cultivar cepas de Aeromonas y medir su absorbancia como se describió anteriormente, centrifugar el caldo bacteriano a 3.500 g durante 15 minutos. Ajusta el caldo bacteriano con medio S y añade 195 microlitros de caldo bacteriano en medio S a ocho pozos de una placa de 96 pozos. Lava los gusanos de la placa ENGM con medio M9. Luego, ajusta la concentración de la solución de lombrices a cinco lombrices por microlitro.

Añade 5 microlitros de la solución de gusano a cada uno de los pozos de la placa de 96 pozos. Incuba la placa en un shaker y cuenta el número de gusanos vivos en 24, 48 y 72 horas.

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Last updated: 27 June 2026