Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Técnicas biológicas
0 visualizaciones • 5:13 min. • July 8th, 2025
Para detectar interacciones ligando-analito mediante interferometría de biocapa, BLI, comience con un biosensor de fibra óptica hidratado fijado en un soporte de instrumento BLI, configurado en el programa deseado.
La punta del biosensor está recubierta con una capa biocompatible inmovilizada con grupos de níquel-ácido nitrilotriacético, Ni-NTA. Sumerja la punta del biosensor en tampón.
El instrumento emite luz blanca hacia el biosensor, que se refleja desde dos interfaces: la capa de referencia interna u óptica y la capa biocompatible. Los haces reflejados interfieren constructiva o destructivamente en diferentes longitudes de onda de luz. Un fotodetector detecta el patrón de interferencia resultante.
Después de la medición de la respuesta interferométrica inicial, agregue una solución de ligando marcada con histidina. Las etiquetas de histidina se unen a cationes de níquel en el biosensor, inmovilizando ligandos en la punta.
Después de la asociación, la luz blanca emitida se refleja desde la capa óptica y la capa biocompatible se inmoviliza con ligandos con un mayor grosor óptico en la punta. Esto aumenta la distancia entre las capas reflectantes, lo que provoca un cambio en el p
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