Expansión ex vivo de células asesinas naturales a partir de células mononucleares de sangre periférica

Las células asesinas naturales, NK, son linfocitos granulares grandes que eliminan tumores e infecciones microbianas.

Para la expansión de células NK ex vivo, tome una suspensión de células mononucleares de sangre periférica, PBMC, que contengan una población heterogénea de linfocitos, incluidas las células NK. Agregue células alimentadoras irradiadas, células linfoblastoides no proliferantes, que expresan interleucina 21 unida a la membrana, mIL-21, necesaria para activar y expandir las células NK.

Agregue el cocultivo en un pozo de cultivo especializado con una membrana permeable al gas en la parte inferior, lo que permite el intercambio de gases. Las células se asientan y proliferan durante un período prolongado sin necesidad de pasar.

Agregue interleucina 2, IL-2 e interleucina 15, IL-15: citocinas para la proliferación de células NK. Incubar durante un período adecuado en condiciones fisiológicas.

mIL-21 en las células alimentadoras se une a un receptor heterodimérico específico en las células NK. La IL-15 y la IL-2 exógenas se unen a sus respectivos receptores. La unión induce diferentes vías de señalización posteriores, activando la expresión génica, limitando la senescencia