Aislamiento de células asesinas naturales del tejido hepático para la expansión selectiva

Para aislar las células asesinas naturales, o células NK, glóbulos blancos especializados involucrados en la inmunidad innata, comience con tejido hepático humano que contenga diversas poblaciones celulares, incluidas células que contienen grasa, eritrocitos, granulocitos, linfocitos y otras células asociadas atrapadas dentro de una matriz extracelular rica en colágeno o ECM.

Pica el tejido en trozos pequeños y transfiérelos a un tubo que contenga colagenasa, una enzima proteolítica. La colagenasa escinde el colágeno, altera la matriz y afloja las células unidas a la MEC.

Inserte el tubo en un disociador de tejidos. Esta disociación mecánica desintegra aún más la ECM para liberar células sueltas en la solución. Filtre el contenido para eliminar el tejido no digerido y los fragmentos de ECM y recolecte el filtrado que contiene varias células.

Vuelva a suspender las células en un tampón que contenga polivinilpirrolidona o perlas de sílice recubiertas de PVP. Las perlas de PVP se unen selectivamente a las células que contienen grasa, separándolas eficazmente del resto de las células.

Centrifugar a baja velocidad para granular la población celular; desechar el sobrenadante que contiene