Un ensayo in vitro para estudiar la interacción entre los neutrófilos y el biofilm

Una biopelícula es una comunidad de bacterias adheridas a la superficie incrustadas dentro de una matriz de sustancias poliméricas extracelulares, EPS, de origen microbiano.

Para estudiar las interacciones entre células inmunitarias y biopelículas in vitro, tome un portaobjetos con un canal que contenga una biopelícula de Staphylococcus aureus, un patógeno oportunista. Las bacterias modificadas expresan una proteína fluorescente para la detección microscópica. El canal se conecta a depósitos llenos de medios para suministrar nutrientes a las bacterias.

Agregue una suspensión de neutrófilos marcados con un tinte fluorescente de seguimiento celular. El medio también contiene un homodímero de etidio, que tiñe el ADN de las células muertas. Incubar en condiciones fisiológicas.

Los receptores de reconocimiento de patrones en los neutrófilos se unen a los patrones moleculares asociados a patógenos en las bacterias. La unión induce a los neutrófilos a fagocitar las bacterias y producir especies reactivas de oxígeno extracelulares o ROS, matando a las bacterias.

Para evadir la respuesta inmune, las bacterias liberan enzimas desintoxicantes que disminuyen la toxina ROS y leucocidina que cau