Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:54 min. • July 8th, 2025
Tome una microplaca que contenga el hongo Candida tropicalis.
Las células secretan Sap2, una enzima proteolítica que escinde una glicoproteína transmembrana llamada Msb2, eliminando su dominio inhibidor.
Esto induce al hongo a adherirse al fondo y convertirse en una microcolonia de levaduras y formas filamentosas. Las células secretan componentes solubles y biopolímeros, iniciando la formación de biopelículas.
Agregue una muestra de suero que contenga anticuerpos específicos de Sap2 a los pocillos seleccionados e incube en la oscuridad.
Los anticuerpos se unen a Sap2 y neutralizan su actividad, impidiendo la viabilidad celular y la maduración de la biopelícula.
En pocillos no tratados, la biopelícula madura en una densa red de células y matriz extracelular.
Aspire el líquido, lave la biopelícula y seque la placa al aire. Agregue un sustrato cromogénico e incube en la oscuridad.
Las células viables, que utilizan oxidorreductasas unidas a la membrana, reducen el sustrato a un producto coloreado.
Transfiera el sobrenadante coloreado y lea la absorbancia.
Una menor absorbancia en los pocillos tratados con suero indica la inhibición de la biopelícula mediada por anticuerpos.
Preparar di
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