Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:28 min. • April 28th, 2025
Coloque un corte de cerebro de ratón en una cámara de perfusión que contenga aCSF bajo un microscopio de dos fotones.
El ratón está diseñado genéticamente para expresar GFP en la microglía, lo que permite el seguimiento del movimiento microglial.
Asegure la rebanada con un soporte.
Usando iluminación de campo claro, ubique la región de interés.
Cambie a iluminación de fluorescencia para visualizar la microglía.
Llene una micropipeta con el compuesto de prueba, móntela en un soporte de jeringa y bájela para tocar la rebanada.
Active el modo de imágenes de dos fotones, enfocando la luz infrarroja cercana de baja energía en el tejido.
En el punto focal del láser, dos fotones combinan su energía para excitar GFP, emitiendo fluorescencia.
Capture imágenes en múltiples planos Z para centrarse en los procesos microgliales.
Registre la actividad de referencia, luego inyecte el compuesto y continúe registrando.
El compuesto se une a los receptores microgliales, desencadenando vías de señalización que impulsan la extensión del proceso microglial hacia la fuente del compuesto.
Monitoree el aumento de fluorescencia cerca del lugar de la inyección a lo largo del tiempo para rastrear el movimiento.
30 min
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