Título encapsulación celular a través de gotitas

Mi nombre es Hang Moon. Estoy trabajando con el profesor de condones. Él y yo trabajamos con la etapa XYJ para hacer una estructura 3D de la célula.

Hola, soy PE y Lynn y estoy trabajando con el proyecto de impresión celular con encapsulación celular y medios y geles. Este es un solenoide para la expulsión de una célula y una mezcla celular de aros sobre el medio celular. La válvula so se activa mediante dos líneas de señal.

La línea de señal proviene de una tabla seca aquí. La señal vino de aquí. Esa línea a través de esa línea, esa es la función del primer generador.

Así que primero se genera por nuestra forma programada. Entonces, si quieres, quieres cambiar la bolsa, puedes cambiar el programa con la línea de interruptores o puedes controlar ese generador de procesos a la computadora. La válvula celular está abierta y cerrada por la señal eléctrica, pero la celda se alimenta a través de esa línea.

La célula y el medio o agrogel se suministran a través de las jeringas de la jeringa. Las jeringas dentro del agua, dentro de la jeringa es la luz de prensa por el aire. El aire presurizado se suministra desde un tanque como aquí la línea.

Por lo tanto, la pequeña línea y el aire izado vuelan a través del filtro de aire. El filtro de aire discrimina el polvo y otros tipos de suciedad. Ese es el generador de presión que lo llamamos, está generando la señal utilizada para abrir la campana de aire solar o cerrar la computadora de la válvula de aire solar está conectada a través del conector P-I-B-U-S-V.

Por lo tanto, podemos usar el puerto USB directamente a nuestro ordenador, el ordenador portátil. Así que ese está conectado con ese lado aquí. Y luego podemos controlar a través de la computadora portátil de control aquí.

Por lo tanto, si queremos sincronizar el movimiento del escenario y la apertura de la campana se puede controlar con el mismo controlador que un ordenador portátil. Por lo tanto, podemos controlar el tiempo en que se abre, cuando se cierra, cuando se mueve y cuando se detiene. Y podemos sincronizar el movimiento y la campana de apertura.

Esa etapa es la etapa motorizada. Se mueve automáticamente a través de la línea de señal de muerte y el motor. Por lo tanto, la motorización es de 0,1 micrómetros.

Por lo tanto, idealmente puede dibujar la línea hasta una línea de 100 milímetros. Así que el eje del chorro se mueve, subiendo y bajando de esa manera. Por lo tanto, controla la tapa entre el sustrato y el cinturón solar.

Por lo tanto, puede controlar la altura de expulsión. Ese sustrato está conectado a las etapas XY aquí, X aquí e Y allá. Así que se está moviendo alrededor de un plan XY.

Por lo tanto, dibuja algunas etapas derechas de demostración de características es tres X, X, Y y G.So el eje de chorro con chorro o el eje XY está controlado por señal aquí. Por lo tanto, la línea de señal está conectada al controlador de movimiento aquí. Ese controlador de movimiento no tiene ningún interruptor manual porque no se puede controlar manualmente.

Se controla a través de la computadora portátil. Por lo tanto, la computadora portátil está conectada. En la parte trasera del controlador, tenemos tres xs para un jet XY de celda de impresión.

Por lo tanto, hace tres tipos diferentes de señal de forma independiente. Y luego el controlador de movimiento se comunica a través de los conectores rf 2, 3, 2 y se conecta directamente al USV. Y luego USV se conecta a la computadora portátil.

Así que el prestatario controlado por computadora portátil. Usamos el programa AutoCAD, hacemos un camino de generación A así bam. Y luego cambió al lenguaje de máquina de esa manera.

Por lo tanto, el lenguaje de la máquina se transfiere a la forma en que el carácter simple y los números así. Hay cada posición relacionada con las etapas X, Y, Z aquí elijo el archivo, contengo ese tipo de programa y luego abro el programa de descarga de esa manera. Y luego elijo del archivo como hace exactamente lo mismo, el archivo de texto.

Solo se descarga el archivo de texto, elija el archivo de texto y descárguelo automáticamente de la computadora portátil al ejecutivo del controlador de movimiento com y luego va al carácter BAM como mencioné antes, BAM. En este matraz se encuentran N IH 3G tres células de fibroblasto de ratón. Y primero voy a aspirar a los viejos medios.

Este proceso consiste en hacer pasar las células y las células se adhieren al fondo del matraz. Así que después de aspirar los medios, voy a poner seis RYS en los que hay una enzima. ¿Bien? Entonces, después de que la tripsina se haya puesto en el matraz, debemos esperar de tres a cinco minutos para que las células se desprendan del fondo del matraz.

Ahora estamos listos para colocar el medio y pasar las células a un tubo de centrífuga. Es una dilución uno a uno. Así que voy a poner seis mil de este medio aquí mismo y voy a lavar un poco las sierras para asegurarme de que todas estén pasadas.

Y ahora las células están listas para ser centrifugadas en este tubo. Ahora vamos a centrifugar estas células a mil rpm, de tres a cinco minutos. Ahora que las células se han convertido en una bolita, voy a aspirar el sobrenadante.

Ahora voy a lavar las células con PBS. Y esto es para, esto es para teñir las células. Los tintes que estamos utilizando son sustratos de esterasa.

Bien, ahora vamos a centrifugar de nuevo y hacer girar las células hasta convertirlas en un paladar. Y voy a aspirar el PBS y voy a resinar las células. Estoy en los medios de comunicación para que me cuenten.

Estoy mezclando las células para que cuando tomemos una muestra, la concentración sea uniforme en todo el tubo. Ahora voy a tomar cien microlitros de las células para medir la densidad celular. Ahora estoy poniendo cien microlitros de tipo y azul, que es una mancha.

Vamos a esperar de tres a cinco minutos para que la mancha penetre en las membranas de las células muertas. Cuando contamos las celdas, las azules no las contamos. Las células están listas para ser contadas con el hemocitómetro, voy a transferir 50 microlitros de la mezcla de células a cada lado del hemocitómetro.

Está bien, voy a cubrirlo con un lado deslizante de vidrio. El hemocitómetro tiene dos caras. Voy a contar el primer lado y después de contar ambos lados, voy a tomar el promedio y luego multiplicar por dos porque tuvimos una dilución de uno a uno con el tipo en azul.

Así que, básicamente, nuestra densidad de células será de 135 por 10 elevado a cuatro células por mil. Para nuestro experimento, utilizaremos una solución celular con una concentración de medio millón de células por mil. Y así, dado que tenemos 13,5 millones de células, voy a resus suspendiendo las células en 27 mil de medios.

Estamos utilizando dos tipos diferentes de tintes. Se trata de un ensayo de muertos vivos a partir de sondas moleculares. Nuestra primera tinción se llama calcio am.

Nuestra segunda tinción se llama homodímero AUM. Tiñe las células muertas. Usamos la excitación azul para obtener fluorescencia verde y la excitación verde para obtener fluorescencia roja Para estas dos manchas, cuando estamos tomando imágenes, nuestra solución de dados se preparará en PBS.

Así que primero voy a transferir cinco milésimas de pulgada de PBS a un tubo de solución salina tamponada con fosfato. Esa es una solución salina. Ahora voy a agregar medio microlitro de calcio am por mil.

Ahora estoy agregando 2.5 microlitros de calcio am al tubo y dos microlitros de un homodímero por mil de PBS. Aquí está la máquina btex. Hace que la célula y los medios estén bien distribuidos por todo el volumen.

Ahora cargamos la celda de 200 microlitros en el siete de aquí. Y luego colocamos la tapa, esta es una tapa herméticamente sellada de esa manera, aquí abro la válvula y luego entra la presión, entra aire ligero y luego ajusto la correa así. Y luego cambió la presión.

Así que me adapto. La presión es de cinco PSI. La presión interior de la tubería es de cinco PSI.

De aquí para acá, se conectaba a través del este dentro del agujero. Así que simplemente abrimos la campana aquí y luego la celda inyectada con la presión de cinco PSI y luego comenzamos a abrir. Y luego la válvula Sona comienza a funcionar.

Y luego enrollamos el sustrato. Su sustrato es solo un simple vidrio deslizante. Y luego cargamos la parte adecuada y pongo un poco de cinta de boceto para fijar el sustrato así, ¿verdad?

Y simplemente, lo arreglo. Así que estamos configurando todo el conjunto de la celda y la válvula y el sustrato durante el movimiento del trabajo ario, comienza a funcionar. Así que estamos configurados todo y luego abrimos el inicio de la válvula.

Y luego movemos el escenario así, ¿verdad? Y luego hacemos un patrón en el sustrato, un patrón en el sustrato y el carácter bam. Voy a sumergir estas gotas que imprimimos en esta solución de tinte que hicimos anteriormente.

Y ahora las gotas se incubarán durante 10 minutos y luego se tomarán imágenes. Primero voy a ajustar la imagen a través del ocular. Nuestra primera imagen es solo una imagen de campo brillante.

Voy a apagar la luz y cambiar el filtro para que tengamos excitación azul, que mostrará fluorescencia verde. Y la tercera imagen que tomaremos es la de las células muertas, que es la tinción Thm Homodimer. Y con luz verde, obtendremos fluorescencia roja.