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DOI: 10.3791/50981-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents techniques for isolating cellular lipid droplets from yeast cells and human placentas using density gradient centrifugation. The resulting floating layer containing the droplets is easily visualized, extracted, and quantified through Western Blot analysis for purity.
Dos técnicas para aislar las gotas de lípidos celulares de 1) las células de levadura y 2) se presentan placentas humanas. La pieza central de ambos procedimientos es la centrifugación en gradiente de densidad, donde la capa flotante resultante que contiene las gotas puede ser visualizado fácilmente por el ojo, se extrae, y se cuantifica por análisis de Western Blot para la pureza.
El objetivo general de este procedimiento es aislar las gotas de lípidos del tejido. Esto se logra diseccionando y separando primero el tejido placentario. A continuación, se homogeneizan las células de la oleína.
A continuación, los orgánulos se separan mediante varios pasos de centrifugación. Finalmente, se recoge la capa flotante que contiene las gotas lipídicas y se caracterizan las gotas lipídicas. En última instancia, se utiliza la microscopía de fluorescencia y el análisis de sangre occidental para mostrar la pureza de la fracción de gotas de lípidos.
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