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Immunology and Infection
Los métodos para la detección cuantitativa de anticuerpos inducida por la activación del compleme...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Los métodos para la detección cuantitativa de anticuerpos inducida por la activación del complemento en los glóbulos rojos

Full Text
31,189 Views
06:29 min
January 29, 2014

DOI: 10.3791/51161-v

Elisabeth M. Meulenbroek1, Diana Wouters1, Sacha Zeerleder1,2

1Department of Immunopathology, Sanquin Research and Landsteiner Laboratory Academic Medical Center,University of Amsterdam, 2Department of Hematology, Academic Medical Center,University of Amsterdam

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aquí se describen dos ensayos para medir la activación del complemento inducida por anticuerpos contra las células rojas de la sangre. La principal ventaja sobre los ensayos actuales es su naturaleza cuantitativa y fácil de interpretar.

El objetivo general del siguiente experimento es evaluar la activación del complemento por anticuerpos contra glóbulos rojos o glóbulos rojos en el suero del paciente. Esto se logra mediante la incubación de glóbulos rojos con suero del paciente en presencia de anticuerpos bloqueantes anti C cinco para inducir la deposición de C cuatro y C3 en la superficie de los glóbulos rojos. A continuación, los glóbulos rojos se tiñen con anticuerpos anti C 4 y anti C3 marcados con fluorescencia, y la cantidad de deposición de complemento en los glóbulos rojos se puede analizar mediante citometría de flujo en un método alternativo.

Los glóbulos rojos se incuban con suero del paciente en ausencia de anti C cinco para inducir la lisis mediada por el complemento. El porcentaje de glóbulos rojos lisados se puede determinar midiendo la cantidad de hemoglobina liberada por las células mediante espectrometría. La principal ventaja de esta nueva técnica frente a los métodos ya existentes, como la hemólisis o el test de antiglobulina, utilizados en el diagnóstico rutinario, es que es de carácter cuantitativo y permite detectar diferencias subóptimas en la activación del complemento.

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