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DOI: 10.3791/51161-v
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Aquí se describen dos ensayos para medir la activación del complemento inducida por anticuerpos contra las células rojas de la sangre. La principal ventaja sobre los ensayos actuales es su naturaleza cuantitativa y fácil de interpretar.
El objetivo general del siguiente experimento es evaluar la activación del complemento por anticuerpos contra glóbulos rojos o glóbulos rojos en el suero del paciente. Esto se logra mediante la incubación de glóbulos rojos con suero del paciente en presencia de anticuerpos bloqueantes anti C cinco para inducir la deposición de C cuatro y C3 en la superficie de los glóbulos rojos. A continuación, los glóbulos rojos se tiñen con anticuerpos anti C 4 y anti C3 marcados con fluorescencia, y la cantidad de deposición de complemento en los glóbulos rojos se puede analizar mediante citometría de flujo en un método alternativo.
Los glóbulos rojos se incuban con suero del paciente en ausencia de anti C cinco para inducir la lisis mediada por el complemento. El porcentaje de glóbulos rojos lisados se puede determinar midiendo la cantidad de hemoglobina liberada por las células mediante espectrometría. La principal ventaja de esta nueva técnica frente a los métodos ya existentes, como la hemólisis o el test de antiglobulina, utilizados en el diagnóstico rutinario, es que es de carácter cuantitativo y permite detectar diferencias subóptimas en la activación del complemento.
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