Estimación Laboratorio de red trófica eficiencias de transferencia de los congéneres de PCB a la trucha de lago ( Salvelinus namaycush) Desde Su Presa

El objetivo general del siguiente experimento es estimar la eficiencia de la transferencia trófica neta de los congéneres de PCB a la trucha de lago desde sus presas, y luego determinar si el grado de cloración o el grado de solubilidad lipídica del congénere de PCB tiene un efecto en su eficiencia de transferencia trófica neta. Esto se logra realizando primero un experimento de laboratorio en el que las truchas de lago son alimentadas con un alimento natural como el blo durante un período de al menos cuatro meses. Como segundo paso, la extracción y limpieza se utiliza para extraer los PCB de los tejidos de trucha de lago y blo y preparar los extractos para el procedimiento de cuantificación.

A continuación, se utiliza la espectrometría de masas por cromatografía de gases mediante ionización química negativa para determinar las concentraciones de congéneres de PCB en los tejidos de los peces. Los resultados muestran que la eficiencia de la transferencia trófica neta de los congéneres de PCB a la trucha de lago desde sus presas no se ve afectada significativamente por el grado de cloración de los congéneres de PCB. Los resultados también muestran que la actividad de la trucha de lago no parece tener un efecto significativo en la eficiencia de la transferencia trófica neta.

La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como la inyección del contaminante directamente en los peces SIV o en la comida de los peces SIV, es que el pez SS acumula el contaminante de una manera que imita mejor el proceso de acumulación de contaminantes en los peces feroces en su entorno natural. La demostración visual de este método es fundamental, ya que los pasos de concentración y extracción requieren mucho cuidado para realizarse correctamente. Estos pasos se aprenden mejor a través de la observación visual.

El demostrador de este procedimiento será Jim O'Keefe, un químico de mi laboratorio. Primero, descongele una cantidad adecuada de peces presa previamente almacenados en un congelador a 30 grados centígrados negativos. Corta el pescado de presa descongelado en trozos que pesen aproximadamente de uno a cinco gramos con un cuchillo de chef.

Después de esto, pesa la cantidad de peces presa que se colocarán en cada uno de los tanques y deja caer las piezas en cada tanque. Después de permitir que el pez depredador se alimente durante aproximadamente una hora, retire la comida y deje que se seque al aire durante unos 20 minutos. Una vez que se haya pesado el alimento, registre la cantidad de alimento colocado en cada tanque y la cantidad de alimento ingerido para cada uno de los tanques.

Después de sacrificar y congelar los peces depredadores, seleccione un conjunto de compuestos de peces depredadores, peces y/o presas para descongelar, y permita que los compuestos se descongelen parcialmente utilizando el homogeneizador del tamaño adecuado. Cada uno de los compuestos. Para cada compuesto, coloque una muestra de 50 a 100 gramos del homogeneizado en un frasco limpio, con acetona, enjuagado y etiquetado.

Después de tapar el frasco, guárdelo a menos 30 grados centígrados hasta el momento del procesamiento para la extracción. Pesar 20 gramos de tejido de pescado homogeneizado descongelado en un vaso de precipitados de 200 mililitros, luego aproximadamente 40 gramos de sulfato de sodio y mezclar bien con una espátula. Agregue una solución de pico sustituto que contenga CONGÉNERES 30, 61, 161 y 166 a una concentración que produzca una concentración final de 20 nanogramos por mililitro.

En el extracto. Deje que la muestra se seque a temperatura ambiente mientras mezcla Cada 20 minutos después de que la muestra haya alcanzado una consistencia de arena seca. Instale un aparato de extracción de soli con un matraz de 500 mililitros que contenga chips de teflón hirviendo, un calcetín, sl y un condensador.

Luego agregue la mezcla de pescado seco a un dedal de vidrio con un fondo de disco fritado grueso. Añada 150 mililitros de una solución premezclada de 50% de hexano y 50% de clorometano al vaso de precipitados utilizado para la muestra y revuelva mientras raspa las paredes del vaso de precipitados. Con una espátula, transfiera el solvente a la parte superior del solit, permitiendo que circule a través del solit y dentro del matraz.

Después de repetir el paso anterior, coloque el calcetín encendido con el matraz adjunto en un elemento calefactor y conecte un condensador. A continuación, encienda el elemento calefactor, llevando el disolvente a ebullición suave. A continuación, extraiga el disolvente durante un mínimo de 16 horas, asegurándose de que se suministra agua fría a los condensadores.

Una vez que el disolvente se haya enfriado, compruebe si alguno de los matraces de muestra contiene agua. Para los matraces que contienen agua, agregue sulfato de sodio y revuelva hasta que se absorba el agua. A continuación, concentre la muestra utilizando un concentrador de muestras de nitrógeno.

Después de que la muestra tenga un volumen de menos de dos mililitros, transfiera la muestra a un matraz aforado de cinco mililitros. A continuación, lleve el volumen final a cinco mililitros utilizando de cinco a siete pequeños lavados de hexano para transferir la muestra residual de la cristalería anterior al matraz aforado. En este punto, transfiera la muestra a un vial de 10 mililitros y etiquételo con la información de la muestra.

Prepare gel de sílice acidificado agregando 44 gramos de ácido sulfúrico concentrado a 100 gramos de gel de sílice activado. A continuación, añada 10 gramos de gel de sílice acidificada en una pequeña columna de cromatografía que contenga un pequeño tapón de lana de vidrio en la parte inferior. Después de limpiar previamente la columna con 10 mililitros de hexano, agregue un mililitro del extracto de muestra, eluya la columna con 20 mililitros de hexano y recoja la muestra en un tubo de vidrio cónico de 20 mililitros.

A continuación, coloque el tubo de vidrio en un evaporador de nitrógeno o un aparato NVAP bajo un chorro de nitrógeno y sumérjalo en agua caliente. Una vez que la muestra se haya concentrado a menos de un mililitro, transfiérala a un matraz aforado de un mililitro. A continuación, lleve el volumen final a un mililitro utilizando dos o tres pequeños lavados de hexano para transferir la muestra residual del tubo al matraz aforado.

Después de esto, transfiera la muestra a un vial de muestreo automático de 1,8 mililitros etiquetado con la información de la muestra. Agregue cuatro microlitros del patrón interno apropiado, que en este caso es deca cloro hinojo al vial. Se utilizan los estándares adecuados para calibrar el instrumento.

A continuación, configure el sistema de espectrometría de masas de cromatografía en el modo de ionización química negativa con hidrógeno como gas portador a un mililitro por minuto y metano como gas reactivo. Utilice una columna capilar de sílice fundida recubierta con DB XLB a 0,25. Espesor de película micrométrico para separación.

Inyecte uno o dos microlitros de la muestra utilizando el modo de inyección dividida. En este punto, analice todos los patrones y muestras por el método estándar interno utilizando carbono 13 marcado con hinojo cloro b DECA. Realice una comprobación de la calibración inicial ejecutando un segundo patrón de fuente y flecha Cloro 1242 y 1260, y luego compare los valores previstos para los congéneres de cloro flecha con las cantidades observadas de este procedimiento de comprobación.

Una vez que el procedimiento de calibración inicial se haya realizado con éxito, complete el análisis de todas las muestras. Ejecute una comprobación de calibración cada 10 muestras utilizando cualquiera de las mezclas de calibración de la calibración inicial. La trucha de lago Tre mostró un crecimiento sustancial como la trucha de lago inicial.

Los pesos medios oscilaron entre 694 y 907 gramos, mientras que los pesos medios finales de las truchas de lago oscilaron entre 853 y 1.566 gramos. Las concentraciones medias de congéneres de PCB en la trucha de lago aumentaron durante el experimento para todos los congéneres de PCB. La eficiencia media de la transferencia trófica neta para la trucha de lago activa no difirió significativamente de la trucha de lago inactiva.

La trucha de lago activa retuvo los congéneres de PCB del alimento que habían consumido con casi la misma eficiencia que la trucha de lago inactiva para 66 de los 75 congéneres de PCB. El error estándar sobre la estimación media de la eficiencia de transferencia trófica neta fue pequeño para seis de los otros nueve congéneres de PCB. Los errores estándar sobre la estimación media de la eficiencia de la transferencia trófica neta fueron bastante bajos, ya que el grado de cloración aumentó, las estimaciones de la eficiencia de la transferencia trófica neta mostraron una ligera disminución.

Sin embargo, la eficiencia de la transferencia trófica neta no varió significativamente con el grado de cloración de los congéneres de PCB AS log KOW aumentado, la eficiencia de la transferencia trófica neta disminuyó exponencialmente. Esta tasa de disminución fue significativamente diferente de cero, pero fue igual al 7% por unidad de log KOW. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo estimar las eficiencias de transferencia trófica neta de los congéneres CB a los peces de sus presas utilizando un experimento de laboratorio en el que los peces ous se alimentan con un alimento natural.

No olvide que trabajar con solventes orgánicos como el hexano y el diclorometano puede ser peligroso y siempre se deben tomar precauciones como la ventilación adecuada al realizar este procedimiento.