Aislamiento y caracterización de ratón antral Los ovocitos Sobre la base de organización de la cromatina nucleolar

El objetivo general de este procedimiento es detallar todos los pasos necesarios para caracterizar los ovocitos antrales de ratón en función de su organización de la cromatina, de acuerdo con su capacidad para mantener completamente un desarrollo embrionario prospectivo. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología del desarrollo, como por ejemplo cómo distinguir y aislar dos tipos diferentes de ovoctos antrales, SN, nucléolo rodeado, y NSN, nucléolo no rodeado, que reside en el compartimento antral del ovario de los mamíferos. Para extraer los ovarios, comience inyectando ratones hembra IP de tres a seis semanas de edad con 2,5 unidades internacionales de gonadotropina sérica de yegua preñada.

Dos días después, aproximadamente una hora antes de la cosecha, llene una placa de Petri estéril con medio M2 y agregue varias gotas de 20 micriliteros de medio M2 a una segunda placa de Petri, cubriendo cada gota con 1,5 mililitros de aceite mineral. Luego, transfiera todas las placas de Petri a una incubadora de dióxido de carbono al 5% de 37 grados Celsius para permitir que el medio se equilibre. A continuación, utilice unas tijeras de disección estériles para hacer una incisión en la piel que cubre la pared abdominal, seguida de una incisión en el peritoneo del primer ratón inyectado con hormonas.