La cuantificación de la expresión de la proteína y Co-localización Uso de multiplexado inmunohistoquímica y tinción de imágenes multiespectrales

El objetivo general de este método es cuantificar objetivamente la expresión y la colocalización de proteínas mediante imágenes multiespectrales. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación básica y la patología diagnóstica, como la forma en que las proteínas cambian la expresión y la localización después del tratamiento, o en la progresión de la enfermedad. La principal ventaja de esta técnica es que elimina la subjetividad del operador inherente a los métodos tradicionales de cuantificación.

Para comenzar el proceso de cuantificación, abra el software de imágenes multiespectrales para crear una biblioteca espectral a partir de portaobjetos de control previamente preparados teñidos con cromógenos individuales y el portaobjetos teñido con hematoxilina. A continuación, abra un cubo de imagen adquirido de una diapositiva de control y seleccione cuatro o cinco áreas teñidas positivamente para definir ópticamente el cromógeno. Repita los pasos con cubos de imagen de otras diapositivas de control hasta que se cree una biblioteca espectral completa que represente todos los cromógenos y, a continuación, guarde la biblioteca espectral.