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DOI: 10.3791/66136-v
Yun Chen*1, Hui Zhang*2, Yaodong Fan3, Liu Yang4,5, Yan Dong*1
1Department of Pathology,The Third Affiliated Hospital of Kunming Medical University & Yunnan Cancer Hospital, 2Department of Gastroenterology,Wu Han NO.1 Hospital, 3Department of Neurosurgery,The Third Affiliated Hospital of Kunming Medical University & Yunnan Cancer Hospital, 4Departments of Biomedical Research Center,The Affiliated Calmette Hospital of Kunming Medical University & The First Hospital of Kunming, 5School of Medical,Yunnan University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for multiplex cyclic immunohistochemistry, enabling the simultaneous detection of multiple markers in lung cancer and brain metastasis samples. The method addresses challenges in antibody specificity and localization of immune cell subpopulations.
La inmunohistoquímica cíclica múltiple permite la detección in situ de múltiples marcadores simultáneamente mediante la incubación repetida antígeno-anticuerpo, el escaneo de imágenes y la alineación e integración de imágenes. En este trabajo se presenta el protocolo operativo para la identificación de sustratos de células inmunitarias con esta tecnología en muestras de cáncer de pulmón y metástasis cerebrales pareadas.
El reto para la inmunohistoquímica es elegir las especies de anticuerpos monoclonales primarios y secundarios para evitar la reactividad cruzada y obtener una mejor especificidad y repetibilidad. La decisión de género es necesaria para optimizar la proporción de dilución de anticuerpos. Mientras tanto, otro desafío es alinear la localización y las subestructuras.
El uso de este protocolo responde a la evolución técnica de la distribución de tres subpoblaciones linfocíticas, como CT tres, CT positiva tres, CT ocho positiva y CT 20 positiva en función de los recuentos celulares y la expresión de proteínas en los tejidos conservados, también se puede observar el nivel de infiltración. En nuestro protocolo, el parámetro Anticuerpos y los anticuerpos secundarios Fluor derivan de diferentes especies en la mezcla iso, lo que nos convierte en un eficiente. Esta medida también muestra una medida específica entre el anticuerpo y el antígeno.
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