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DOI: 10.3791/56293-v
Thomas A. Angelovich1,2, Anna C. Hearps1,3, Anna Maisa1, Theodoros Kelesidis4, Anthony Jaworowski1,3
1Centre for Biomedical Research,Burnet Institute, 2School of Health and Biomedical Sciences,RMIT University, 3Department of Infectious Diseases,Monash University, 4University of California, Los Angeles
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Se describe un protocolo para medir la transmigración por monocitos a través de monocapas endoteliales humanas y su posterior maduración en células espumosas. Esto proporciona un método versátil para evaluar las propiedades aterogénicas de monocitos aislados de personas con diferentes enfermedades y evaluar factores en sangre que puede aumentar esta propensión.
El objetivo general de este ensayo es cuantificar la capacidad de los monocitos de muestras clínicas humanas para experimentar migración transendotelial y formación de células espumosas. Este método se puede utilizar para responder a preguntas clave en el campo cardiovascular, como el potencial aterogénico de las células de individuos que corren el riesgo de sufrir enfermedad arterial coronaria aguda. La principal ventaja de esta técnica es que las muestras clínicas se pueden medir tanto a partir de sangre entera fresca como de cohortes de pacientes almacenadas.
Además, la formación de células espumosas se puede cuantificar tanto por microscopía como por citometría de flujo. Primero, prepare los geles de colágeno polimerizado a partir de una suspensión de colágeno fresco. A un tubo de poliestireno de cinco mililitros, agregue hidróxido de sodio, luego M199 10 veces, luego ácido ácido y, finalmente, agregue colágeno fibroso.
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