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Métodos de estudio cambios de agregación inherente de proteína con la edad en Caenorhabditis ...
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JoVE Journal Biology
Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Métodos de estudio cambios de agregación inherente de proteína con la edad en Caenorhabditis elegans

Full Text
9,183 Views
11:57 min
November 26, 2017

DOI: 10.3791/56464-v

Nicole Groh1,2, Ivan Gallotta1, Marie C. Lechler1,2, Chaolie Huang1, Raimund Jung1, Della C. David1

1Protein Aggregation and Aging,German Center for Neurodegenerative Diseases (DZNE), 2Graduate School of Cellular and Molecular Neuroscience,German Center for Neurodegenerative Diseases (DZNE)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

El método presentado aquí pretende explorar la agregación de proteínas durante el envejecimiento normal en el organismo modelo Caenorhabditis elegans. El protocolo representa una poderosa herramienta para el estudio de los agregados grandes altamente insolubles que se forman con la edad y determinar cómo cambios en proteostasis impactan de agregación de la proteína.

El objetivo general de este experimento es detectar cambios en la insolubilidad de proteínas con la edad en C. elegans y evaluar cómo la eliminación de genes dirigidos influye en este marcador de envejecimiento. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo del envejecimiento y la proteostasis, como por qué los organismos no logran mantener un proteoma saludable con la edad. La principal ventaja de esta técnica es la posibilidad de estudiar la agregación de proteínas durante el envejecimiento normal en ausencia de procesos patológicos.

Aunque este método puede proporcionar información sobre la agregación de proteínas en C. elegans, también se puede adaptar a otros organismos modelo, por ejemplo, para estudiar la insolubilidad de proteínas relacionada con la edad en ratones. Para comenzar el tratamiento, agregue 207,45 mililitros de medio basal S con reactivos adicionales como se describe en el protocolo de texto adjunto a un matraz de cultivo de Fernbach de 2,800 mililitros. Añadir una concentración final de 50 microgramos por mililitro de carbenicilina y un milimolar de IPTG y cerrar el matraz con un tapón de rosca de membrana.

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Bioquímica número 129 envejecimiento insolubilidad de la proteína agregación de proteínas proteínas mal plegamiento proteostasis C. elegans las enfermedades neurodegenerativas bioquímica

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