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JoVE Journal Genetics
Tissue-specific miRNA Expression Profiling in Mouse Heart Sections Using In Situ Hybridization

MiRNA de tejidos específicos perfiles de expresión en ratón corazón secciones usando el hibridación In Situ

Full Text
8,630 Views
08:22 min
September 15, 2018

DOI: 10.3791/57920-v

Fani Memi1, Daniela Tirziu2, Irinna Papangeli3

1Department of Cell and Developmental Biology,University College London, 2Yale Cardiovascular Research Group, Section of Cardiovascular Medicine,Yale School of Medicine, 3Yale Cardiovascular Research Center, Section of Cardiovascular Medicine,Yale School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

micro-RNAs (miRNAs) son cortas y altamente homólogas secuencias de ARN, que sirven como reguladores post-transcripcionales de mensajero RNAs (mRNAs). Los métodos actuales de detección de miRNA varían en sensibilidad y especificidad. Se describe un protocolo que combina en situ el hibridación y el immunostaining para la detección simultánea de moléculas miRNA y la proteína en secciones de tejido de corazón de ratón.

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo del microARN, proporcionando herramientas para detectar la relativa lcalización de moléculas de proteínas y microARN. La principal ventaja de esta técnica es que se pueden detectar moléculas de proteínas y microARN de la misma sección tisular. Este protocolo comienza con una rehidratación de los tejidos montados en las diapositivas.

Caliente los portaobjetos a 60 grados centígrados durante 10 minutos en el horno de hibridación. La parafina debe derretirse visiblemente. A continuación, incubar los portaobjetos en un frasco de Coplin de vidrio que contenga un agente de limpieza disponible comercialmente durante 10 minutos.

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Genética expresión de micro-RNA número 139 perfiles sonda LNA hibridación en situ immunostaining hipertrofia cardiaca

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