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Visualización de estructura del tejido adiposo blanco 3D utilizando tinción de Whole-mount
Visualización de estructura del tejido adiposo blanco 3D utilizando tinción de Whole-mount
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JoVE Journal Biology
Visualization of 3D White Adipose Tissue Structure Using Whole-mount Staining

Visualización de estructura del tejido adiposo blanco 3D utilizando tinción de Whole-mount

Full Text
17,498 Views
06:19 min
November 17, 2018

DOI: 10.3791/58683-v

Yanqing Jiang*1, Joanna Lan-Hing Yeung*1, Ju Hee Lee1,2, James An1, Patrick E. Steadman3, Jae-Ryong Kim4, Hoon-Ki Sung1,2,5

1Translational Medicine Program,The Hospital for Sick Children, 2Department of Laboratory Medicine and Pathobiology,University of Toronto, 3Neurosciences & Mental Health Program,The Hospital for Sick Children, 4Department of Biochemistry and Molecular Biology, Smart-Aging Convergence Research Center, College of Medicine,Yeungnam University, 5Banting and Best Diabetes Centre,University of Toronto

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study demonstrates a whole-mount immunostaining technique ideal for 3D imaging of adipose tissue architecture and cellular components. This method helps address key questions in adipose biology, particularly how intercellular interactions and tissue physiology vary under metabolic conditions like fasting and obesity.

Key Study Components

Research Area

  • Adipose tissue architecture
  • Cellular interactions in metabolic conditions
  • Immunostaining techniques

Background

  • The importance of preserving adipose tissue morphology
  • Limitations of conventional immunohistochemistry
  • Potential applications in other organ systems

Methods Used

  • Whole-mount immunostaining
  • Adipose tissue and other organ systems
  • Confocal laser microscopy for imaging

Main Results

  • Whole-mount staining preserves adipocyte morphology and enables accurate interpretation of results
  • Significant changes in adipocyte size and blood vessel density observed upon fasting
  • Demonstrates enhanced visibility of neural structures after tissue clearing

Conclusions

  • The technique effectively retains 3D structure of adipose tissue, facilitating the study of metabolic responses
  • It provides insights into the cellular architecture and functionality of adipose tissue relevant to metabolic research

Frequently Asked Questions

What is the significance of whole-mount immunostaining?
It preserves the 3D structure of adipose tissue, allowing for accurate morphological studies.
How does this method compare to traditional techniques?
Traditional methods often involve lengthy processing steps and may distort tissue morphology, whereas whole-mount immunostaining avoids these issues.
Can this method be applied to other tissues?
Yes, it can be applied to various organ systems, including the nervous system.
What challenges do beginners face with this technique?
Finding proper tissue sites, fixation periods, and antibody concentrations are common difficulties.
What key changes in adipose tissue were observed during fasting?
Fasting led to smaller adipocyte sizes and increased blood vessel density, indicating lipolysis.
What role does tissue clearing play in this study?
Tissue clearing enhances optical transparency and visibility of neural structures in adipose tissue.
How does the study contribute to future biological research?
It provides a reliable method for studying metabolic responses and cellular interactions within tissues.

El objetivo del presente estudio es demostrar la técnica de inmunotinción y visualización de conjunto de montaje como un método ideal para la proyección de imagen 3D del componente celular y arquitectura de tejido adiposo.

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología adiposa, como cómo las interacciones intercelulares y la fisiología del tejido adiposo cambian en diferentes condiciones metabólicas como el ayuno y la obesidad. La principal ventaja de esta técnica es que conserva de forma óptima la estructura 3D adiposa original y evita largos pasos de procesamiento que suelen ser necesarios para la inmunohistoquímica convencional. Aunque este método puede proporcionar información sobre la estructura del tejido adiposo, también se puede aplicar a otros sistemas de órganos, como el sistema nervioso, mediante la tinción de montaje completo del cerebro.

Generalmente, individuos nuevos en este método lucharán debido a las dificultades para obtener sitios de tejido de la propiedad, encontrar el período de fijación adecuado, y las concentraciones óptimas de anticuerpos. Una vez completada la disección, transfiera el plato que contiene las muestras de tejido en 1%paraformaldehído del hielo a temperatura ambiente durante una hora. Luego transfiera los tejidos a una placa de cultivo celular de 12 o 24 pozos para un lavado más rápido.

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