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DOI: 10.3791/58683-v
Yanqing Jiang*1, Joanna Lan-Hing Yeung*1, Ju Hee Lee1,2, James An1, Patrick E. Steadman3, Jae-Ryong Kim4, Hoon-Ki Sung1,2,5
1Translational Medicine Program,The Hospital for Sick Children, 2Department of Laboratory Medicine and Pathobiology,University of Toronto, 3Neurosciences & Mental Health Program,The Hospital for Sick Children, 4Department of Biochemistry and Molecular Biology, Smart-Aging Convergence Research Center, College of Medicine,Yeungnam University, 5Banting and Best Diabetes Centre,University of Toronto
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study demonstrates a whole-mount immunostaining technique ideal for 3D imaging of adipose tissue architecture and cellular components. This method helps address key questions in adipose biology, particularly how intercellular interactions and tissue physiology vary under metabolic conditions like fasting and obesity.
El objetivo del presente estudio es demostrar la técnica de inmunotinción y visualización de conjunto de montaje como un método ideal para la proyección de imagen 3D del componente celular y arquitectura de tejido adiposo.
Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la biología adiposa, como cómo las interacciones intercelulares y la fisiología del tejido adiposo cambian en diferentes condiciones metabólicas como el ayuno y la obesidad. La principal ventaja de esta técnica es que conserva de forma óptima la estructura 3D adiposa original y evita largos pasos de procesamiento que suelen ser necesarios para la inmunohistoquímica convencional. Aunque este método puede proporcionar información sobre la estructura del tejido adiposo, también se puede aplicar a otros sistemas de órganos, como el sistema nervioso, mediante la tinción de montaje completo del cerebro.
Generalmente, individuos nuevos en este método lucharán debido a las dificultades para obtener sitios de tejido de la propiedad, encontrar el período de fijación adecuado, y las concentraciones óptimas de anticuerpos. Una vez completada la disección, transfiera el plato que contiene las muestras de tejido en 1%paraformaldehído del hielo a temperatura ambiente durante una hora. Luego transfiera los tejidos a una placa de cultivo celular de 12 o 24 pozos para un lavado más rápido.
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