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Microscopía de dos fotones sensible a la polarización para una caracterización estructural amiloi...
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JoVE Journal Chemistry
Polarization-Sensitive Two-Photon Microscopy for a Label-Free Amyloid Structural Characterization

Microscopía de dos fotones sensible a la polarización para una caracterización estructural amiloide sin marcadores

Full Text
1,694 Views
05:54 min
September 8, 2023

DOI: 10.3791/65670-v

Maciej Lipok1, Patryk Obstarczyk1, Joanna Olesiak-Bańska1

1Institute of Advanced Materials,Wrocław University of Science and Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este artículo describe cómo se podría aplicar la microscopía de dos fotones sensible a la polarización para caracterizar la organización local dentro de las superestructuras de amiloide sin marcado-esferulitas. También describe cómo preparar y medir la muestra, ensamblar la configuración requerida y analizar los datos para obtener información sobre la organización local de las fibrillas amiloides.

Nuestro objetivo es desarrollar nuevos marcadores ópticos y técnicas para la detección de agregados proteicos llamados amiloides. Están implicados en una serie de enfermedades como la enfermedad de Alzheimer y la diabetes tipo dos. Por lo tanto, para curar estas enfermedades, necesitamos tener técnicas para visualizar los amiloides.

Demostramos que la microscopía de dos fotones se puede utilizar para detectar la orientación de las fibrillas amiloides dentro de las superestructuras amiloides. Se puede lograr no solo usando colorantes específicos de amiloide, sino también utilizando la autofluorescencia de amiloides. Dado que nuestra técnica opera en fenómenos ópticos no lineales, puede lograr una fotoselección angular reducida, mejorar la resolución axial, una menor dispersión de la luz, una menor fototoxicidad y una penetración más profunda de la muestra en comparación con la técnica microscópica de fluorescencia de un fotón.

La microscopía de fluorescencia de dos fotones sensible a la polarización es una herramienta prometedora para obtener imágenes de la estructura interna de varias estructuras biológicas complejas, no solo agregados de proteínas, sino también vesículas de ADN y membranas lipídicas.

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Sensible a la polarización Microscopía de dos fotones Sin marcas Caracterización estructural de amiloide Experimentos de bioimagen Fototoxicidad Penetración tisular Sistemas densamente empaquetados Fotoselección angular Fluoróforos Análisis de polarización Microscopía de fluorescencia de dos fotones (2PFM) Organización molecular Métodos de imagen estándar Procesos ópticos lineales 2PFM sensible a la polarización (ps-2PFM) Ordenamiento molecular Bioestructuras complejas Esferulitas amiloides Enfermedades neurodegenerativas Alzheimer Parkinson Agregados de proteínas amiloides Alteración del proceso de plegamiento incorrecto de proteínas Métodos de diagnóstico Ordenamiento local de fibrillas Esferulitas de insulina bovina

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