Análisis de estructuras amiloides en una sección de tejido mediante microscopía de imágenes de fluorescencia de por vida

Tome una sección de tejido con agregados amiloides que representen depósitos de proteínas anormales.

El tejido se tiñe con el colorante fluorescente ácido heptámero-formil tiofeno acético o hFTAA, que se une específicamente a las estructuras de láminas beta de las fibrillas amiloides.

Obtener imágenes del portaobjetos utilizando un microscopio confocal equipado con una unidad de microscopía de imágenes de fluorescencia de por vida, que mide la vida útil de fluorescencia de las moléculas de colorante.

Optimice la configuración del microscopio para una excitación efectiva de las moléculas de colorante.

Cuando la luz láser ilumina el tejido, el hFTAA excita y emite fluorescencia.

Una unión de colorante más fuerte en estructuras compactas da como resultado una vida útil más larga, mientras que una unión de tinte más débil en estructuras menos compactas conduce a una vida útil más corta.

Más tarde, el software genera una imagen codificada por colores del agregado.

Los colores, como el rojo y el amarillo, aparecen en la periferia, lo que indica una vida útil de fluorescencia más corta que refleja estructuras amiloides menos compactas e inestables.

Mientras que los colores como el azul y el