Name: Protocolos experimentales de cribado, inmunocitoquímica y técnicas de imagen basadas en microscopía para Penium margaritaceum (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: Aprende técnicas de microscopía confocal y electrónica para estudiar la dinámica de la pared celular en Penium margaritaceum. Este método permite analizar la respuesta al estrés y la plasticidad fenotípica en este alga modelo.

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<ol><li>Delmer, D., Dixon, R. A., Keegstra, K., Mohnen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+plant+cell+wall-dynamic%2C+strong%2C+and+adaptable-is+a+natural+shapeshifter%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">The plant cell wall-dynamic, strong, and adaptable-is a natural shapeshifter.</a> Plant Cell. 36 (5), 1257-1311 (2024).</li>
<li>Bierenbroodspot, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogeny+and+evolution+of+streptophyte+algae%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Bot%22%5BJournal%5D)">Phylogeny and evolution of streptophyte algae.</a> Ann Bot. 134 (3), 385-400 (2024).</li>
<li>Domozych, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endomembrane+architecture+and+dynamics+during+secretion+of+the+extracellular+matrix+of+the+unicellular+charophyte%2C+Penium+margaritaceum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Bot%22%5BJournal%5D)">Endomembrane architecture and dynamics during secretion of the extracellular matrix of the unicellular charophyte, Penium margaritaceum.</a> J Exp Bot. 71 (11), 3323-3339 (2020).</li>
<li>Feng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomes+of+multicellular+algal+sisters+to+land+plants+illuminate+signaling+network+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Genomes of multicellular algal sisters to land plants illuminate signaling network evolution.</a> Nat Genet. 56 (5), 1018-1031 (2024).</li>
<li>Jiao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Penium+margaritaceum+genome%3A+Hallmarks+of+the+origins+of+land+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The Penium margaritaceum genome: Hallmarks of the origins of land plants.</a> Cell. 181, 1097-1111 (2020).</li>
<li>LoRicco, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+multifunctional+roles+of+the+extracellular+matrix+in+the+sessile+life+of+the+zygnematophyte+Penium+margaritaceum%3A+stick%2C+glide+and+cluster%5BTitle%5D)+AND+%22Physiologie+Plantarum%22%5BJournal%5D)">The multifunctional roles of the extracellular matrix in the sessile life of the zygnematophyte Penium margaritaceum: stick, glide and cluster.</a> Physiologie Plantarum. 176 (5), e14520(2024).</li>
<li>LoRicco, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+growth+and+expansion+in+Penium+margaritaceum+triggered+by+disruption+of+microtubules+and+the+cell+wall%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Bot%22%5BJournal%5D)">Aberrant growth and expansion in Penium margaritaceum triggered by disruption of microtubules and the cell wall.</a> J Exp Bot. erae387, (2024).</li>
<li>LoRicco, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemically+induced+phenotype+plasticity+in+the+unicellular+zygnematophyte%2C+Penium+margaritaceum%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Chemically induced phenotype plasticity in the unicellular zygnematophyte, Penium margaritaceum.</a> Protoplasma. 261 (6), 1233-1249 (2024).</li>
<li>Davis, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Callose+deposition+is+essential+for+the+completion+of+cytokinesis+in+the+unicellular+alga%2C+Penium+margaritaceum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Callose deposition is essential for the completion of cytokinesis in the unicellular alga, Penium margaritaceum.</a> J Cell Sci. 133 (19), jcs.249599(2020).</li>
<li>Rydahl, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penium+margaritaceum+as+a+model+organism+for+cell+wall+analysis+of+expanding+plant+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Penium margaritaceum as a model organism for cell wall analysis of expanding plant cells.</a> Methods Mol Biol. 1242, 1-22 (2015).</li>
<li>Carrillo-Carrasco, V. P., Hernández-García, J., Weijers, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroporation-based+delivery+of+proteins+in+Penium+margaritaceum+and+other+zygnematophycean+algae%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Plant%22%5BJournal%5D)">Electroporation-based delivery of proteins in Penium margaritaceum and other zygnematophycean algae.</a> Physiol Plant. 175 (6), e14121(2023).</li>
<li>Nichols, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+media-freshwater%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+Phycol+Methods%22%5BJournal%5D)">Growth media-freshwater.</a> Handbook Phycol Methods. , 16-17 (1973).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,5 ml por microcent. Tubos</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-549-740</td><td></td></tr><tr><td>Microplaca de 12 pocillos</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-233-6077</td><td></td></tr><tr><td>cubreobjetos de 22 x 22 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-541-016</td><td></td></tr><tr><td>cubreobjetos de 45 x 50 cm</td><td>Brain Research</td><td>4550-1.5D</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9414</td><td></td></tr><tr><td>anti-rata FITC</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F6258</td><td></td></tr><tr><td>anti-rata TRITC</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T4280</td><td></td></tr><tr><td>cloruro de calcio</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C4981</td><td></td></tr><tr><td>Cambbridge stubs</td><td>EMS</td><td>75183-65</td><td></td></tr><tr><td>Fluoview CLSM</td><td>Evident</td><td>Fluoview 1200</td><td></td></tr><tr><td>JIM5</td><td>Kerafast</td><td>ELD004</td><td></td></tr><tr><td>JIM7</td><td>Kerafast</td><td>ELD005</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrífuga</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-100-675</td><td></td></tr><tr><td>Micropipetors</td><td>BioRad</td><td>1660499EDU</td><td></td></tr><tr><td>Penium margaritaceum&nbsp; </td><td>Sammlung von Algenkulturen der Universit&auml; t G&ouml; ttingen&nbsp;- Cultivo de Recolección de Algas en G&ouml; ttingen University</td><td>2640</td><td></td></tr><tr><td>Kit</td><td>Polysphere Polysciences</td><td>18336</td><td></td></tr><tr><td>SEM</td><td>ThermoFisher</td><td>Quattro SEM</td><td></td></tr><tr><td>recubridor por pulverización catódica</td><td>EMS</td><td>Q150V</td><td></td></tr><tr><td>Mezclador de vórtice</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-215-414</td><td></td></tr></tbody></table>

protocolos experimentales de cribado, inmunocitoquímica y técnicas de imagen basadas en microscopía para penium margaritaceum

Experimental Screening Protocols, Immunocytochemistry and Microscopy-based Imaging Techniques for Penium margaritaceum

El marcaje de la pared celular de P. margaritaceum con mAbs anti-pectina (por ejemplo, JIM5) revela una red de fibras complejadas con calcio y proyecciones que forman un patrón regular o red (Figura 1). La pectina se deposita en el centro celular o istmo, donde desplaza a la pectina más vieja hacia los polos (Figura 2). El marcaje con un anticuerpo JIM7 similar a la pectina diferente destaca la secreción inicial de pectina con alto contenido de metilest...

Protocolos experimentales de cribado, inmunocitoquímica y técnicas de imagen basadas en microscopía para Penium margaritaceum

The cell wall is the first component of signal reception/transduction for a plant cell during development and when responding to environmental abiotic and ...

experimental-screening-protocols-immunocytochemistry-microscopy-based

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Este artículo describe la tubería de vídeo de alto rendimiento que se ha establecido con éxito para infectar y analizar un gran número de embriones de pez cebra que proporcionan una nueva herramienta potente para las pruebas de compuesto y el descubrimiento de fármacos usando todo un organismo animal vertebrado.

Establecimiento y Optimización de una instalación de alto rendimiento para el Estudio<em&gt; Staphylococcus epidermidis</em&gt; Y<em&gt; Mycobacterium marinum</em&gt; La infección como modelo para el descubrimiento de fármacos

Se describe un método mediante el cual se pueden utilizar nanopartículas de puntos cuánticos (QD) para estudios inmunocitoquímicos correlativos de tejido de patología humana incrustado en epoxi. Empleamos QDs conjugados con fragmentos de anticuerpos comerciales que se visualizan mediante microscopía de luz de fluorescencia de campo amplio y microscopía electrónica de transmisión.

Correlativa a la luz y microscopía electrónica de Uso de Quantum Dot nanopartículas

Los problemas en el procesamiento de muestras biológicas para la observación de microscopía electrónica de barrido incluyen el colapso celular, el tratamiento de muestras de microambientes húmedos y la destrucción celular. Aquí se compilan y detallan protocolos de bajo costo y relativamente rápidos adecuados para preparar muestras desafiantes como meristemos florales, quistes de oomicetos y hongos (Agaricales).

Escaneado de Protocolos de Microscopía Electrónica (SEM) para la Problemática de la planta, Oomycete, y muestras de hongos

Aquí, proporcionamos una, de bajo costo fácil, y eficiente en el tiempo de protocolo para fijar químicamente el tejido cerebral de los primates con fijador acroleína, lo que permite la conservación a largo plazo que es compatible con inmunohistoquímica pre-inclusión para microscopía electrónica de transmisión.

Preparación de tejido cerebral de primates no humanos para Pre-incrustación de inmunohistoquímica y la microscopía electrónica de

Un método de microscopía electrónica correlativos (CLEM) se aplica a estructuras intracelulares inducida por virus de imagen mediante microscopia electrónica (EM) en las células que son previamente seleccionadas por microscopía de luz (LM). EM y LM se combinan como un enfoque de imagen híbrida para lograr una visión integrada de las interacciones virus-huésped.

Correlativos luz microscopia electrónica (CLEM) para el seguimiento y proyección de imagen proteína Viral asociada a estructuras en las células inmovilizadas de Cryo

Análisis de SEM es un método eficaz para ayudar en la identificación de las especies o la discriminación fenotípica. Este protocolo describe los métodos para examinar los detalles morfológicos específicos de tres tipos representativos de organismos y sería ampliamente aplicable a examinar características de muchos organismos y tipos de tejidos.

Preparación de los organismos procarióticos y eucarióticos con secado químico para análisis morfológico en microscopía electrónica de barrido (SEM)

La microscopía electrónica de barrido serial de cara de bloque (SBEM) se aplica para obtener imágenes y analizar espinas dendríticas en el hipocampo murino.

Microscopía electrónica de barrido serial de cara de bloque (SBEM) para el estudio de espinas dendríticas

Este protocolo tiene como objetivo proporcionar procedimientos detallados para recolectar, fijar y mantener muestras de plantas micoheterótrofas, aplicando diferentes técnicas de microscopía como microscopía electrónica de barrido y transmisión, microscopía de luz, confocal y fluorescencia para estudiar la colonización fúngica en tejidos vegetales y semillas germinadas con hongos micorrícicos.

Técnicas de microscopía para interpretar la colonización fúngica en tejidos de plantas micoheterótrofas y germinación simbiótica de semillas

Presentamos un protocolo detallado para la microscopía correlativa de luz y electrónica posterior a la inclusión de Epon utilizando una proteína fluorescente llamada mScarlet. Este método puede mantener la fluorescencia y la ultraestructura simultáneamente. Esta técnica es susceptible de una amplia variedad de aplicaciones biológicas.

Microscopía electrónica y de luz correlativa de inclusión posterior a Epon

Este protocolo describe los pasos detallados de la microscopía inmunoelectrónica previa a la incorporación, con un enfoque en la exploración de los circuitos sinápticos y la localización de proteínas en la retina.

Investigación de circuitos retinianos y localización molecular mediante microscopía inmunoelectrónica previa a la inclusión

Aprende técnicas de microscopía confocal y electrónica para estudiar la dinámica de la pared celular en Penium margaritaceum. Este método permite analizar la respuesta al estrés y la plasticidad fenotípica en este alga modelo.

Protocolos experimentales de cribado, inmunocitoquímica y técnicas de imagen basadas en microscopía para Penium margaritaceum

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