Collecte de sang répétées pour des tests sanguins dans le poisson zèbre adulte

Liqing Zang; Yasuhito Shimada; Yuhei Nishimura; Toshio Tanaka; Norihiro Nishimura

doi:10.3791/53272

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Article de méthode

Collecte de sang répétées pour des tests sanguins dans le poisson zèbre adulte

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DOI :

10.3791/53272

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30 août 2015

Liqing Zang¹ , Yasuhito Shimada² , Yuhei Nishimura² , Toshio Tanaka² , Norihiro Nishimura¹

¹Department of Translational Medical Science, Graduate School of Medicine, Mie University, ²Department of Molecular and Cellular Pharmacology, Pharmacogenomics, and Pharmacoinformatics, Graduate School of Medicine, Mie University

Dans cet article

Résumé

Des prélèvements sanguins répétés sont nécessaires et importants dans la recherche animale. Nous avons mis au point une méthode nouvelle, non létale et fiable pour le prélèvement répété de sang chez le poisson-zèbre adulte, et nous avons appliqué cette méthode à l’étude de la biochimie du sang, y compris le métabolisme du glucose.

Résumé

Collecte de sang répétées est une des techniques les plus courantes effectuées sur des animaux de laboratoire. Cependant, un protocole non létal pour le prélèvement de sang à partir du poisson zèbre n'a pas été établie. Les méthodes précédentes pour la collecte de sang de poisson zèbre sont mortelles, comme incision latérale, la décapitation et la queue ablation. Ainsi, nous avons développé une nouvelle méthode "répétée" de collecte de sang, et présente ici un protocole détaillé décrivant cette procédure. Cette méthode est peu invasive et se traduit par un taux de mortalité très faible (2,3%) pour le poisson-zèbre, permettant ainsi répété le prélèvement de sang à partir du même individu. Le volume maximal de prélèvement de sang est fonction de poids du corps du poisson. Le volume pour un échantillonnage répété de sang à des intervalles doit être ≤0.4% du poids du corps de chaque semaine ou ≤1% toutes les 2 semaines, qui ont été évalués par des mesures de l'hémoglobine dans le sang. En outre, l'hémoglobine, la glycémie à jeun, le plasma triacylglycérols (TG) et c totaleniveaux de holesterol chez le poisson zèbre adultes mâles et femelles ont été mesurés. Nous avons également appliqué cette méthode pour étudier la dysrégulation du métabolisme du glucose dans l'obésité induite par l'alimentation. Cette méthode de collecte de sang permet de nombreuses applications, y compris le glucose et le métabolisme des lipides et des études hématologiques, ce qui augmentera l'utilisation du poisson zèbre comme organisme modèle de maladie humaine.

Introduction

Zebrafish gagnent en popularité comme un modèle précieux de maladies humaines parce que leurs organes et la génétique sont similaires à ceux des humains ^1,2. Dans le domaine de la biologie du développement, de nombreuses études ont démontré que le poisson zèbre et de montrer humaine marqués similitude dans l'hématopoïèse ^3, hémostase ^4,5 et ⁶ myélopoïèse. Poisson zèbre adultes sont également utilisés pour l'étude immunologique ^{7, 8} et les maladies neurodégénératives liées à l'obésité ^{9 car} cet organisme modèle actions voies communes avec ceux perturbé dans les maladies humaines. Pour l'....