Optogénétique du poisson-zèbre : activation des neurones somatosensoriels génétiquement modifiés pour étudier les réponses comportementales des larves

0 vues • 0:04 min • April 30th, 2023

- Chez les larves de poisson-zèbre, un stimulus visuel peut activer les neurones somatosensoriels et déclencher une réponse de fuite. Il existe deux types de neurones de ce type dans la larve, les neurones trijumeaux et Rohon-Beard. Nous pouvons manipuler l’activité de ces neurones en les modifiant pour exprimer des canaux ioniques transgéniques sensibles à la lumière. Cette approche s’appelle l’optogénétique.

Pour réaliser cette technique, montez une larve transgénique avec la face dorsale vers le haut dans du gel d’agarose et placez-la sous un microscope à dissection. À l’aide d’une lame de rasoir, détachez une partie cunéiforme d’agarose autour du jaune et de la queue. Remplissez cette zone avec de l’eau d’œuf. Retirez l’agarose du tronc et de la queue de la larve.

Positionnez l’extrémité d’un câble optique près du tronc où se trouve le corps cellulaire du neurone de Rohon-Beard. Délivrez une impulsion de lumière laser bleue. Lors de l'exposition à la lumière bleue, les canaux ioniques transgéniques sensibles à la lumière dans la membrane du neurone s'ouvrent, permettant aux ions d'entrer, déclenchant un potentiel d'action qui déclenche la réponse d'échappement. Enregistrez le c

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