Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:49 min • July 8th, 2025
Les enzymes dégradant les glucides décomposent les polysaccharides complexes en oligosaccharides plus petits.
Pour dépister l’activité de dégradation enzymatique, commencez par prendre plusieurs hydrogels de polymères chromogènes, CPH, qui sont préparés en colorant des polysaccharides avec des colorants chlorotriazines de différentes couleurs. Chaque polysaccharide est ensuite réticulé chimiquement pour former de l’hydrogel - un substrat synthétique pour la dégradation enzymatique.
Maintenant, distribuez différents substrats CPH dans des puits distincts d’une plaque de réaction poreuse. Ajoutez une solution d’activation et incubez-la pour assurer une activation optimale des substrats.
Placez la plaque de dosage sur une plaque de produit vide. Centrifugez les plaques ensemble à basse vitesse pour faciliter l’élimination efficace de la solution d’activation à travers les pores de la plaque réactionnelle.
Ensuite, complétez tous les puits de la plaque réactionnelle avec le même type d’enzyme dégradant les glucides dans un tampon approprié qui maintient un pH optimal pour l’activité enzymatique. Scellez la plaque et incubez-la avec une légère agitation pour permettre une distribution u
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