Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 6:25 min • July 8th, 2025
Pour la détection quantitative d’une protéine spécifique dans le lysat cérébral de souris à l’aide de l’électrochimiluminescence, ECL, immunoessai, commencez par une plaque de dosage multi-puits.
Les puits comprennent des électrodes de travail et des contre-électrodes conductrices, complétant le circuit électrique. Une couche diélectrique sépare les électrodes, améliorant ainsi la sensibilité du dosage.
Ajoutez des anticorps monoclonaux primaires de souris contre la protéine cible dans les puits. Les électrodes de travail, avec une plus grande capacité de liaison, facilitent l’immobilisation des anticorps sur celles-ci.
Incuber avec une solution contenant des protéines, en se liant aux surfaces de liaison restantes du puits, réduisant ainsi les interférences de fond.
Ajouter du lysat de fraction nucléaire de cerveau de souris. La protéine cible du lysat se lie spécifiquement aux anticorps monoclonaux.
Ajoutez des anticorps polyclonaux non marqués, en reconnaissant et en se liant aux épitopes de la protéine, qui sont liés aux anticorps monoclonaux primaires sur l’électrode. Ajoutez des anticorps secondaires spécifiques marqués avec un complexe de ruthénium, se liant aux anticorps no
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