Induction de l’entérocolite nécrosante dans un modèle d’entérocolite épithéliale humaine

Obtenir des cryptes dérivées de tissus de l’intestin grêle humain - des invaginations tubulaires contenant des cellules souches et divers types de cellules épithéliales.

Ajoutez les cryptes intestinales dans une matrice de sous-sol réfrigérée.

Transférez ce mélange dans une plaque multipuits, créant un dôme tridimensionnel.

Ajouter le milieu de culture et incuber.

Les cellules souches s’auto-organisent, prolifèrent et se différencient en plusieurs types de cellules intestinales, formant des entérosphères.

Au fil du temps, les entérosphères se transforment en entéroïdes – des structures tridimensionnelles qui s’auto-renouvellent, ressemblant aux cryptes intestinales.

Ajoutez des lipopolysaccharides, ou LPS, une endotoxine bactérienne, dans le puits contenant l’entéroïde et incuber.

Les

molécules de LPS se lient au récepteur de type Toll dans l’entéroïde, initiant une réponse pro-inflammatoire, entraînant l’accumulation d’espèces réactives de l’oxygène. Cela déclenche une cascade d’événements menant à l’apoptose.

Par conséquent, l’intégrité de l’entéroïde est compromise, ce qui entraîne la pénétration du LPS dans la lumière, intensifiant encore la réponse inflammatoire.

Cela imite le