Stimulation optogénétique et enregistrement électrophysiologique d’événements synaptiques dans des coupes de cerveau de rat

0 vues • 3:18 min • July 8th, 2025

Commencez par une tranche de cerveau de rat contenant la région neuronale cible connectée à un axone sensible à la lumière d’une autre région du cerveau.

Placez la tranche dans la chambre d’enregistrement immergée et fixez-la avec une ancre de tranche.

Au microscope, localisez la couche souhaitée et identifiez le neurone pyramidal cible.

Soulevez l’objectif du microscope pour créer un ménisque avec la surface de la tranche.

Abaissez une micropipette en verre remplie de solution d’enregistrement intracellulaire dans ce ménisque.

Touchez la cellule pyramidale identifiée avec la pointe de la pipette pour créer une encoche dans la membrane.

Appliquez une aspiration pour former un joint.

Augmentez l’aspiration jusqu’à ce que la membrane se rompe, établissant une configuration à cellules entières.

À l’aide d’une source lumineuse montée, appliquez des impulsions lumineuses sur la tranche.

Ces impulsions lumineuses déclenchent un potentiel d’action dans l’axone sensible à la lumière, libérant des neurotransmetteurs au niveau de la fente synaptique.

Enregistrez les réponses du neurone pyramidal à ces libérations pour analyser l’efficacité synaptique.

Pour l’identification de la cellule cibl

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