Génération d’un modèle sphéroïde tridimensionnel d’invasion de cellules tumorales
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:18 min • April 28th, 2025
Prenez une culture de cellules tumorales cérébrales humaines.
Traiter avec une enzyme de dissociation pour perturber les jonctions cellulaires, en séparant les cellules agrégées.
Laver avec un tampon pour arrêter l’activité enzymatique, puis ajouter un milieu de culture pour maintenir la viabilité cellulaire.
Introduisez de la méthylcellulose, un agent de suspension.
Transfère la suspension dans une microplaque à fond rond et incuber.
La méthylcellulose visqueuse maintient les cellules en suspension, favorisant les interactions cellule-cellule pour l’agrégation en sphéroïdes.
Mélangez les sphéroïdes avec une matrice de collagène qui imite l’environnement extracellulaire physiologique.
Transférez la suspension dans une microplaque et incuberez, permettant à la matrice de former un gel qui piège les sphéroïdes.
Ajouter le milieu de croissance sur le gel.
À la périphérie sphéroïde, les cellules tumorales perdent leur adhésion cellule-cellule et adoptent un phénotype invasif.
Ces cellules sécrètent des protéases pour dégrader la matrice, étendent les protubérances pour s’ancrer et avancent, envahissant la matrice.
Le modèle sphéroïde présentant une invasion tumorale est prêt pour l’analyse.
Pour
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