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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Use of a High-throughput In Vitro Microfluidic System to Develop Oral Multi-species Biofilms

Utilisation d'un haut-débit In Vitro Système microfluidique pour développer orales biofilms multi-espèces

Full Text
14,075 Views
07:09 min
December 1, 2014

DOI: 10.3791/52467-v

Derek S. Samarian1, Nicholas S. Jakubovics2, Ting L. Luo1, Alexander H. Rickard1

1Department of Epidemiology, School of Public Health,The University of Michigan, 2Centre for Oral Health Research, School of Dental Sciences,Newcastle University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le but de ce document sur les méthodes est de décrire l'utilisation d'un système microfluidique pour le développement de biofilms multi-espèces qui contiennent généralement des espèces identifiées dans la plaque dentaire supra-gingival humain. Méthodes pour décrire l'architecture du biofilm, biofilm viabilité, et une approche de la récolte biofilm pour les analyses de culture-dépendante ou indépendante de la culture sont mis en évidence.

L’objectif général de cette procédure est de créer des biofilms de plaque dentaire multi-espèces représentatifs de la composition. Parallèlement à l’analyse, cela se fait en créant d’abord un média et un inoculum représentatifs. L’inoculum est ensuite introduit dans la puce microfluidique après une nuit d’incubation, un biofilm se forme à l’intérieur du micro-canal.

Enfin, le biofilm est lavé et coloré pour une microscopie à balayage laser confocale in situ ou une microscopie à fluorescence épi. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme les cellules à flux est qu’il s’agit d’un système à haut débit qui permet de réaliser plusieurs expériences en parallèle tout en utilisant moins de matériaux et en ne nécessitant pas de milieux de laboratoire artificiels. Pour commencer, prélevez des échantillons de salive d’une cohorte de cinq volontaires ou plus dans des tubes en plastique individuels de 50 millilitres.

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Bioengineering Numéro 94 la plaque dentaire biofilm microscopie confocale à balayage laser structure tridimensionnelle pyroséquençage analyse d'image la reconstruction de l'image de la salive modélisation COMSTAT Imaris ImageJ multi-espèces communautés biofilm.

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