Un protocole optimisé pour le radiomarquage efficace de nanoparticules d'or à l'aide d'un ¹²⁵ I-étiqueté Azide prothétique Groupe

L’objectif global de ce protocole est de fournir une méthode de synthèse efficace et rapide pour les nanoparticules d’or marquées à l’iode radioactif en utilisant la réaction de clic sans cuivre promue par la souche. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la radiochimie, telles que la synthèse de radio-isotopes marqués environ trois ans, ainsi que des sondes d’imagerie régulières pour des études d’imagerie PAD ou spec. Le principal avantage de cette technique est qu’un à cinq iodes marqués avec des particules dorées peuvent être synthétisés efficacement à l’aide d’un groupe prothétique azoté avec un excellent rendement radiochimique et une excellente pureté radiochimique.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car les étapes d’évaluation radio sont difficiles à apprendre. Étant donné que de telles procédures nécessitent une installation appropriée et une expérience de l’étiquetage radio. Parallèlement à l’étude, Ha Eun Shim, étudiant en radio, fera une démonstration de la procédure.

Pour effectuer la réaction d’iodation radio, ajoutez une solution de précurseur dans un tube de 1,5 mL. Ajouter 10 microlitres d’acide acétique à la solution de précurseur à température ambiante. Ajoutez ensuite 150 méga bekarel d’iode 125 dans 50 microlitres, 0,1 molaire d’hydroxyde de sodium au mélange réactionnel.

Ajouter une solution de chloramine T et fermer le tube de microcentrifugation contenant le mélange réactionnel. Incuber le mélange réactionnel à température ambiante pendant quinze minutes jusqu’à ce que la réaction d’iodation radioélectrique soit complète. Ajoutez ensuite une solution de métabisulfite de sodium au mélange réactionnel pour éteindre la réaction d’iodation radio.

Prélever 0,2 microlitre du produit brut, puis le diluer avec 100 microlitres de 50 % d’acéto nitryle dans de l’eau pour une chromatographie liquide à haute performance, ou analyse HPLC. Analysez le produit brut dilué à l’aide d’une radio-HPLC analytique en phase inverse. Transférez l’intégralité du mélange réactionnel dans un flacon HPLC.

Rincez le tube de réaction avec 0,5 mL d’acéto nitryle et ajoutez le rinçage dans le même flacon d’injection. Diluer la solution recueillie avec un mL d’eau. Pour purifier le produit brut avec la HPLC réparatrice, injectez le produit brut dans une radio HPLC préparative.

Recueillir le pic radioactif représentant l’azoture marqué à l’iode 125 dans un tube à essai en verre. Mesurer le rendement radiochimique de la fraction à l’aide d’un calibrateur de dose de radioactivité conformément au protocole du fabricant. Injectez ensuite le produit purifié dans une radio-HPLC analytique en utilisant les mêmes conditions HPLC pour déterminer la pureté radiochimique du produit.

Pour effectuer l’extraction en phase solide du produit, diluez la fraction contenant le produit désiré avec 40 mL d’eau pure. Ajouter la solution diluée dans une cartouche TC18 préconditionnée. Lavez la cartouche avec 15 ml d’eau supplémentaire.

Éluez le produit piégé dans la cartouche avec 2 mL d’acétone dans un flacon en verre de 10 mL protégé par un bouclier en plomb. Mesurer la radioactivité du produit élué à l’aide d’un calibrateur de dose de radioactivité selon le protocole du fabricant. Après évaporation de l’acétone, dissoudre le résidu avec 100 à 200 microlitres de DMSO pour la prochaine étape de marquage radio.

Effectuer la synthèse de nanoparticules d’or modifiées du groupe DBCO comme décrit dans le protocole texte. Préparez une solution concentrée de nanoparticules d’or modifiées du groupe DBCO par centrifugation. Et ajustez la concentration des nanoparticules d’or à deux micromolaires.

Ajoutez 4,1 méga bekarel d’azoture marqué à l’iode 125 dans 5 microlitres de DMSO à une suspension de 50 microlitres de nanoparticules d’or micromolaires. Incuber le mélange réactionnel obtenu à 40 degrés Celsius pendant 60 minutes. Prélever une alloquote de 0,2 microlitre du produit brut et l’appliquer sur une plaque de chromatographie sur couche mince ou de CCM codée à la silice.

Développer la plaque TLC en utilisant de l’acétate d’éthyle comme phase mobile. Placez la plaque TLC sur un scanner radio TLC et exécutez le scanner pour surveiller la réaction d’étiquetage radio conformément au protocole du fabricant. Purifier le mélange réactionnel contenant les nanoparticules d’or marquées à l’iode 125 par centrifugation.

Décantez le surnageant et ajoutez de l’eau pure pour la remise en suspension des pastilles de nanoparticules d’or. Prélever une allocation de 0,2 microlitre du produit purifié et l’appliquer sur une plaque de TLC recouverte de silice. Développer la plaque CCM en utilisant de l’acétate d’éthyle comme phase mobile.

Placez la plaque CCM sur un scanner radio CCM et exécutez le scanner pour déterminer le rendement radiochimique et la pureté radiochimique des nanoparticules d’or marquées à l’iode 125, conformément au protocole du fabricant. Les résultats représentatifs du groupe prothétique azoté marqué à l’iode 125 sont présentés ici. Un rendement radiochimique de 75 % a été déterminé à l’aide d’un calibrateur de dose de radioactivité.

Le résultat analytique de la radio HPLC montre une excellente pureté radiochimique du produit. Les résultats représentatifs de la nanoparticule d’or marquée à l’iode 125 sont présentés ici. L’analyse Radio TLC présente que le rendement radiochimique et la pureté de la nanoparticule d’or purifiée étaient supérieurs à 95 %. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en trois heures si elle est correctement exécutée.

Les implications de cette technique se sont étendues à la préparation de diverses sondes moléculaires à des fins thérapeutiques d’imagerie nucléaire, car la chimie de marquage de la méthode actuelle est très efficace et simple. N’oubliez pas que travailler avec de l’iode radioactif peut être extrêmement dangereux et que des précautions telles que des briques plus légères ou des chaussures plus légères doivent toujours être prises lors de l’exécution de cette procédure.