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DOI: 10.3791/55087-v
Fabio Cafini*1,2, Nguyen Thi Le Thuy*3, Federico Román4, José Prieto5, Sarah Dubrac6,7, Tarek Msadek6,7, Kazuya Morikawa1
1Division of Biomedical Science, Faculty of Medicine,University of Tsukuba, 2Department of Basic Biomedical Science,Universidad Europea de Madrid, 3Human Biology Program, School of Integrative and Global Majors,University of Tsukuba, 4Laboratory of Nosocomial Infections, Department of Bacteriology, Centro Nacional de MicrobiologÍa,Instituto de Salud Carlos III, 5Division of Microbiology, Department of Medicine, School of Medicine,Universidad Complutense, 6Biology of Gram-Positive Pathogens, Department of Microbiology,Institut Pasteur, Paris, France, 7ERL3526,CNRS, Paris, France
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Nous décrivons ici trois protocoles différents pour l'enquête in vitro de la conjugaison, la transduction et la transformation naturelle de Staphylococcus aureus.
L’objectif global de cette procédure est de fournir une méthodologie détaillée pour étudier la transmission horizontale de l’ADN dans le staphylocoque doré en s’attaquant aux trois principales voies de transfert. Conjugaison, transduction et transformation naturelle. Cette méthode consiste en un transfert horizontal de gènes résistants aux antibiotiques dans le staphylocoque doré pathogène humain.
Le principal avantage des techniques présentées ici est que nous pouvons tester trois modes de transfert majeurs, y compris la transformation génétique naturelle récemment découverte. Pour commencer l’expérience, préparez cinq millilitres de culture de nuit des bactéries donneuses et receveuses dans un bouillon de soja tryptique. Ou TSB medium avec et sans 32 milligrammes par litre de chloramphénicol, respectivement.
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