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DOI: 10.3791/55722-v
Yueying Li2, Yong Hai1, Jiayu Chen3, Tie Liu1
1Department of Orthopedics, Beijing Chao-Yang Hospital,Capital Medical University, 2Key Laboratory of Genomic and Precision Medicine, Beijing Institute of Genomics,Chinese Academy of Sciences, 3Clinical and Translational Research Center of Shanghai First Maternity & Infant Hospital, School of Life Sciences and Technology,Tongji University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nous présentons un protocole pour générer une lignée chondrogénique à partir de sang périphérique humain (PB) via des cellules souches pluripotentes induites (iPSC) en utilisant une méthode sans intégration, qui comprend la formation de corps embryoïde (EB), l'expansion des cellules fibroblastiques et l'induction chondrogénique.
L’objectif global de cette procédure est de générer des cellules de lignée chondrogénique à partir de cellules souches pluripotentes induites dérivées du sang périphérique humain, ou cellules IPS. Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine de la régénération du cartilage sur l’utilisation de cellules sanguines périphériques dérivées de patients en tant que cellules C pour la génération de cellules IPS pour la réparation du cartilage. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle est facilement reproductible et que la différenciation des chondrocytes se produit dans des conditions sériques et sans xéno.
Commencez par plaquer des cellules IPS humaines dans un milieu IPSC humain de quatre millilitres sur une boîte de culture tissulaire de 60 millimètres contenant une monocouche de cellules nourricières de fibroblastes embryonnaires de souris irradiées. Cultivez les cellules à 37 degrés Celsius dans cinq pour cent de dioxyde de carbone. Lorsque les cellules souches sont confluentes à 80 à 90 pour cent, dissociez les cellules avec une solution de dispace pour la sous-culture.
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