Différenciation dirigée de cellules endothéliales hémogéniques à partir de cellules souches pluripotentes humaines

Ce protocole détaille une méthode pour générer une population bien caractérisée de cellules endothéliales hémogènes humaines. Ces cellules peuvent être utilisées pour étudier la régulation moléculaire et la transition endothéliale-hématopoïétique. Commencez par cultiver des cellules souches embryonnaires humaines pendant quatre jours pour les différencier en cellules endothéliales primordiales.

Le cinquième jour, aspirez le milieu au-dessus des cellules. Ensuite, lavez doucement les cellules avec un millilitre de DMEM / F-12 par puits. Ajouter un millilitre de milieu de différenciation des cellules endothéliales hémogènes fraîchement préparé par puits et incuber les cellules pendant 24 heures à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone.