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DOI: 10.3791/55778-v
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Une méthode de spectrométrie de masse en tandem en masse (LC-MS / MS) sélective et sensible couplée à une extraction efficace en phase solide sur une microplaque à 96 puits d'échange de cations (MCX) à mode mixte a été développée pour la mesure de la 3-nitrotyrosine libre ( 3-NT) dans l'urine humaine à haut débit, ce qui convient aux applications cliniques.
L’objectif global de cette extraction miniaturisée en phase solide combinée au dosage LC-MS/MS est de quantifier avec précision la 3-nitrotyrosine libre dans l’urine humaine pour des applications cliniques. La 3-nitrotyrosine libre aide aux rendements et constitue un biomarqueur du stress oxydatif. Cependant, il restera un défi particulier de quantifier avec précision la 3-nitrotyrosine dans les urgences biologiques pour les applications cliniques en raison d’une sensibilité insuffisante, d’une sélectivité et de préparations d’échantillons lourdes.
Cette technique incorporant une extraction efficace en phase solide dans une interaction LC-MS/MS très sensible permet une détermination rapide, spécifique et précise de faibles niveaux de 3-nitrotyrosine endogène dans l’urine humaine sans avoir besoin de constitution et de LC bidimensionnelle. Les implications de cette technique pourraient être étendues à la surveillance de l’efficacité du traitement antioxydant, car le niveau de 3-nitrotyrosine peut être réduit par les antioxydants. Pour commencer cette procédure, vortex a préalablement préparé et décongelé des échantillons d’urine, des étalons et des échantillons de contrôle qualité.
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