June 1st, 2017
Les expériences traditionnelles d'électrophorèse sur gel en dentelle (SGE) nécessitent un appareil compliqué et une forte consommation chimique. Ce travail présente un protocole qui décrit une méthode peu coûteuse pour séparer les fragments d'ADN dans un court laps de temps.
Le passage introduit un nouveau système sur l’électrophorèse sur gel SNAP. Ce système peut non seulement réduire considérablement le temps d’expérience de conception chimique, mais peut également réaliser un suivi en temps réel dans une séparation dans le gel d’agarose par smartphone. Ces trois images représentent un résultat typique après électrophorèse sur gel de 50, 100 et 1 000 paires de bases dans une échelle.
Chaque fragment d’ADN était bien séparé. L’électrophorèse sur gel SNAP est le moyen le plus inventif de séparer les fragments d’ADN et, par conséquent, elle est considérée comme un tuteur de vaisseaux dans l’analyse biochimique et biologique. Cette fois, je vais vous montrer une nouvelle méthode sur l’expérience d’électrophorèse sur gel SNAP.
D’accord, commençons. Tout d’abord, nous pesons 0,1 gramme de gel d’agarose et le mettons dans une fiole, un tampon TPE dans la fiole. Le volume de la solution préparée ne doit pas dépasser le tiers de la capacité de la fiole.
Fermez le ballon avec la fumée de conservateur, puis le mélange de tampon d’agarose a été chauffé au micro-ondes. Avant de mettre le ballon au micro-ondes, nous faisons quelques trous dans la fumée de conservation en cas d’explosion. Maintenez la solution d’agarose montée dans les canaux du tube d’électrophorèse sur gel SNAP.
Posez le peigne dans la solution. La solution montée refroidira et deviendra à l’état de gel à température ambiante quelques minutes plus tard. Sortez du peigne pour créer des puits et ajoutez-y un tampon TBE.
Nous avons construit un système simple de séparation de fragments d’ADN de suivi en temps réel pour observer l’état de mouvement des fragments d’ADN par smartphone. Mélangez d’abord l’échelle d’ADN avec SYBR Green One par centrifugation. Chargez le mélange dans le puits dans le gel d’agarose.
Deuxièmement, allumez la source lumineuse LED et placez un filtre passe-bande au-dessus de la LED, puis placez l’électrode dans les deux voies de la puce. Ensuite, placez un autre filtre passe-bande au-dessus. Attendez la source d’alimentation.
Réglez la puissance électrique à 180 watts. Allumez votre smartphone pour enregistrer le processus de séparation des fragments d’ADN. Par exemple, nous utilisons un smartphone pour suivre la séparation de 50 paires de bases d’ADN.
L’électrophorèse sur gel SNAP est le moyen le plus efficace de séparer les fragments d’ADN. Cependant, des expériences abandonnées indiquent que l’électrophorèse sur gel SNAP était limitée par la longueur totale des problèmes. Premièrement, les séparations prennent plusieurs heures, voire plusieurs jours.
Deuxièmement : la perception chimique est très élevée. Trois : car cela nécessite beaucoup d’appareils. Quatrièmement : le système d’imagerie sur gel ne peut observer les fragments d’ADN séparés qu’une fois l’expérience terminée.
De plus, l’iridium et le brome qui sont couramment utilisés dans l’électrophorèse sur gel SNAP sont mutagènes et cancérogènes. Après l’expérience, chaque fragment d’ADN a été bien séparé. De plus, nous avons séparé les mêmes échantillons dans les quatre canaux de la puce d’électrophorèse sur gel SNAP, et le problème que les fragments d’ADN étaient de la même taille se déplaçaient de la même distance dans chaque expérience.
De l’image, les fragments d’ADN ont été bien séparés, bien qu’il y ait des doutes sur le fait que les fragments d’ADN semblent blancs sur la figure B.It peuvent être améliorés en optimisant les paramètres de la puce et la concentration du gel d’agarose. Après avoir regardé cette vidéo, vous devez voir notre nouveau message sur l’électrophorèse sur gel SNAP. De plus, les fragments d’ADN qui en résultent semblent blancs.
Cela peut être amélioré en optimisant les paramètres de votre puce d’électrophorèse sur gel SNAP et la concentration du gel d’agarose. Ce qui est important, c’est qu’il faut être très prudent lors des prises car il faut une tension élevée et il peut devenir réactif.
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Cet article présente l'électrophorèse sur gel SNAP, une nouvelle méthode de séparation des fragments d'ADN qui réduit considérablement la consommation de produits chimiques et le temps d'expérience. Le système permet un suivi en temps réel de la séparation de l'ADN à l'aide d'un smartphone.