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Déterminer le rôle des gènes exprimés par la mère dans le développement précoce des croustillants...
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JoVE Journal Genetics
Determining the Role of Maternally-Expressed Genes in Early Development with Maternal Crispants

Déterminer le rôle des gènes exprimés par la mère dans le développement précoce des croustillants maternels

Full Text
2,653 Views
10:08 min
December 21, 2021

DOI: 10.3791/63177-v

Cara E. Moravec1, Gabriella C. Voit1, Francisco Pelegri1

1Laboratory of Genetics,University of Wisconsin-Madison

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a novel CRISPR-Cas9 technique to identify maternal-effect phenotypes in early development. By utilizing multiplexing guide RNAs, researchers can rapidly uncover the roles of maternally-expressed genes in a single generation.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Genetics

Background

  • The function of many maternally-expressed genes during early development remains largely unknown.
  • Understanding these genes is crucial for insights into early embryogenesis.
  • Maternal mRNA transcripts play a significant role in the development of gametes.
  • Identifying maternal effect genes can enhance our knowledge of developmental processes.

Purpose of Study

  • To develop a method for the rapid identification of maternal effect genes.
  • To investigate the role of these genes in early embryonic development.
  • To provide a protocol that can be utilized by researchers in the field.

Methods Used

  • Microinjection of embryos at the one-cell stage.
  • Multiplexing guide RNAs targeting specific maternal genes.
  • Assessment of somatic mutations in injected embryos.
  • Creation of guide RNA templates using specific oligonucleotides.

Main Results

  • Successful identification of novel maternal effect phenotypes.
  • Demonstrated the effectiveness of the CRISPR-Cas9 technique in a single generation.
  • Provided insights into the function of maternal mRNA transcripts.
  • Established a protocol for future research in maternal gene function.

Conclusions

  • The CRISPR-Cas9 technique is a powerful tool for studying maternal-effect genes.
  • This research enhances our understanding of early developmental processes.
  • Future studies can build on this protocol to explore additional maternal genes.

Frequently Asked Questions

What is the significance of maternal-effect genes?
Maternal-effect genes are crucial for early embryonic development, influencing various developmental processes.
How does the CRISPR-Cas9 technique work in this study?
The technique uses multiplexing guide RNAs to target specific maternal genes, allowing for rapid identification of their effects.
What stage of development is targeted for microinjection?
Microinjection is performed at the one-cell stage of embryonic development.
What are the expected outcomes of this research?
The research aims to identify novel maternal effect phenotypes and enhance understanding of maternal gene functions.
Can this method be applied to other species?
While this study focuses on a specific model, the method can potentially be adapted for use in other species.
What are the implications of understanding maternal mRNA transcripts?
Understanding these transcripts can provide insights into the mechanisms of early embryogenesis and developmental biology.

Le développement précoce dépend des produits hérités de la mère, et le rôle de bon nombre de ces produits est actuellement inconnu. Ici, nous avons décrit un protocole qui utilise CRISPR-Cas9 pour identifier les phénotypes d’effet maternel en une seule génération.

Le rôle de nombreux gènes exprimés par la mère au cours du développement précoce est actuellement inconnu. Cette technique CRISPR maternelle permet l’identification rapide des gènes d’effet maternel et de leur rôle dans le développement. Le multiplexage guide les ARN vers un seul gène permet aux chercheurs d’identifier de nouveaux phénotypes d’effets maternels en une seule génération.

Cette recherche est bénéfique pour comprendre la fonction des transcrits d’ARNm dans les gamètes, qui sont nécessaires à l’embryogenèse précoce. La clé de cette technique est de micro-injecter les embryons au début du stade d’une cellule, et de vérifier que la majorité des ARN guides peuvent faire des mutations somatiques dans les embryons injectés. Pour créer un modèle d’ARN guide pour chaque oligonucléotide spécifique au gène, analyte à l’oligonucléotide constant et remplir les surplombs avec de l’ADN polymérase T4.

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