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Technique quantitative de fractionnement des microtubules pour séparer les microtubules stables, ...
Technique quantitative de fractionnement des microtubules pour séparer les microtubules stables, ...
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JoVE Journal Biochemistry
Quantitative Microtubule Fractionation Technique to Separate Stable Microtubules, Labile Microtubules, and Free Tubulin in Mouse Tissues

Technique quantitative de fractionnement des microtubules pour séparer les microtubules stables, les microtubules labiles et la tubuline libre dans les tissus de souris

Full Text
2,760 Views
07:21 min
November 17, 2023

DOI: 10.3791/63358-v

Ayaka Hagita-Tatsumoto1,2, Tomohiro Miyasaka1,2,3

1Department of Neuropathology, Faculty of Life and Medical Sciences,Doshisha University, 2Center for Research in Neurodegenerative Diseases,Doshisha University, 3Laboratory of Physiology and Anatomy, School of Pharmacy,Nihon University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les microtubules, qui sont des polymères de tubuline, jouent un rôle crucial en tant que composant du cytosquelette des cellules eucaryotes et sont connus pour leur instabilité dynamique. Cette étude a mis au point une méthode de fractionnement des microtubules pour les séparer en microtubules stables, microtubules labiles et tubuline libre afin d’évaluer la stabilité des microtubules dans divers tissus de souris.

Notre nouveau protocole permet de distinguer et de quantifier trois statuts des anneaux tubulaires, tels que les microtubules stables, les microtubules labiles et les tubules libres dans les tissus animaux. Cette technique est composée d’étapes simples et permet d’évaluer la stabilité structurelle des tubes, qui ne peut pas être détectée par la quantification des tubes après modification translationnelle. Cette méthode est essentielle pour la recherche et le développement de moyens thérapeutiques pour les maladies où la stabilité des microtubules est critique, comme la maladie d’Alzheimer et les cancers.

Commencez la procédure en préparant le vêtement de laboratoire pour la dissection tissulaire. Remplissez une boîte de glace pilée et placez-y deux boîtes de Pétri. Remplissez un plat avec une solution tampon de phosphate glacée ou PBS pour le lavage transitoire et le stockage des tissus disséqués.

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