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DOI: 10.3791/65447-v
David Pires1,2,3, Paulo J. G. Bettencourt1,2
1Faculty of Medicine,Universidade Católica Portuguesa, 2Center for Interdisciplinary Research in Health,Universidade Católica Portuguesa, 3Host-Pathogen Interactions Unit, Research Institute for Medicines, iMed-ULisboa, Faculty of Pharmacy,Universidade de Lisboa
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
La détermination des unités formant des colonies (UFC) est la technique de référence pour quantifier les bactéries, y compris Mycobacterium tuberculosis qui peut prendre des semaines pour former des colonies visibles. Nous décrivons ici une micro-UFC pour la détermination de l’UFC avec une efficacité accrue en termes de temps, un espace de laboratoire et un coût de réactif réduits, et une évolutivité pour les expériences à moyen et haut débit.
La détermination de l’UFC est nécessaire pour mesurer l’efficacité de la réponse immunitaire contre les bactéries. Cependant, il est très faible et devient encombrant et coûteux lorsqu’il est appliqué à des bactéries pathogènes telles que Mycobacterium tuberculosis. Il s’agit d’une limitation importante lorsque nous devons tester de grands panels de traitements.
La recherche se concentre sur la tuberculose et sur l’évaluation des vaccins antituberculeux. Il explore l’innocuité, l’immunogénicité et l’efficacité des vaccins contre Mycobacterium tuberculosis. L’étude présente une méthode optimisée pour le dénombrement des colonies bactériennes afin d’évaluer l’efficacité du vaccin dans les études précliniques.
Ce protocole vise à optimiser la détermination de l’UFC en générant des résultats à partir d’une petite gouttelette similaire à celle d’une boîte de Pétri ordinaire. La quantification de la viabilité des bactéries à partir d’un si petit échantillon nous permet d’analyser des milliers de points de données en utilisant une fraction des matériaux et du temps nécessaires à la méthode classique. Notre recherche vise à disséquer la machinerie de présentation de l’antigène et à identifier les antigènes les plus pertinents pour optimiser la présentation de l’antigène.
Cela nous permettra de concevoir et de développer de meilleurs vaccins pour améliorer ou remplacer le vaccin antituberculeux actuel, qui est le BCG.
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