Visualisation des foyers d’ADN monocaténaire dans la phase G1 du cycle cellulaire

La réponse aux dommages de l’ADN est indispensable à la vie. Comme l’ADN est constamment exposé à divers moteurs nocifs, l’absence de leur réparation entraîne une instabilité des génomes et des maladies. Nous avons développé une méthode basée sur les propriétés biologiques de la RPA2, pour visualiser le tractus d’ADN simple brin au cours de la réparation de l’ADN à différents stades du cycle cellulaire.

La méthode traditionnelle de détection de l’ADN simple brin utilise des anticorps BrdU. Cette approche peut être utilisée pour répliquer activement les cellules. De plus, cet anticorps a tendance à réagir de manière croisée avec d’autres analogues nucléotidiques, ce qui limite leur utilisation.

Contrairement à BRDU, notre approche a un rapport signal sur bruit plus élevé, ce qui la rend utilisable à chaque phase du cycle. Il est crucial de comprendre l’action des différentes voies de réparation de l’ADN dans les différentes phases du cycle cellulaire et les cellules potentiellement non réplicatives. Notre protocole fournit une nouvelle approche et un nouvel outil pour visualiser les foyers d’ADN simple brin, là où les approches classiques utilisant BrdU sont limitées.

Une compréhension complète des processus de réparation de l’ADN pourrait servir de cibles thérapeutiques pour traiter le cancer, le vieillissement et les maladies neurologiques. La plupart de nos cellules sont différenciées en phase terminale et ne se répliquent donc pas et ne se divisent pas. Il est crucial de mieux comprendre comment ces cellules réparent diverses lésions de l’ADN.

Par conséquent, notre laboratoire se concentrera principalement sur les processus de réparation de l’ADN post-réplicatif et développera de nouveaux outils pour les étudier.