Un protocole efficace pour évaluer la modulation de l’activité ERK dans des modèles précoces de poisson zèbre du syndrome de Noonan via la microscopie FRET en direct et l’immunofluorescence

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09:58 min

2 mai 2025

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Les RASopathies sont des syndromes génétiques multisystémiques causés par l’hyperactivation de la voie RAS-MAPK. Des variants potentiellement pathogènes en attente de validation émergent en permanence alors que de mauvaises preuves précliniques limitent le traitement. Ici, nous décrivons notre protocole in vivo pour tester et valider les niveaux d’activation ERK associés à RASopathy et sa modulation pharmacologique au cours de l’embryogenèse par imagerie FRET en direct chez le <

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Modèles de poisson-zèbre

Chapters in this video

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Introduction

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Microinjection et traitement d'embryons de poisson-zèbre pour l'imagerie FRET et les essais d'inhibition de MEK

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Imagerie FRET multispectrale sur canlı de modèles de RASopathies chez le poisson-zèbre

4:57

Post-traitement et séparation des colorants pour l'imagerie FRET ratiométrique

7:03

Analyse quantitative des signaux FRET et rendu d'image

8:14

Évaluation des phénotypes morphologiques et analyse d'images d'embryons de poisson-zèbre

9:41

Conclusion

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