Name: Manipulation et analyse des processus dépendants du cycle cellulaire chez les levures bourgeonnantes (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-26T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Découvrez la synchronisation du cycle cellulaire chez Saccharomyces cerevisiae pour étudier la ségrégation chromosomique et la localisation protéique. Cette méthode révèle les dynamiques mitotiques essentielles à la division cellulaire.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>?-facteur</td><td>Installation de synthèse centrale de l’Université de l’Utah</td><td></td><td>Séquence : WHWLQLKPGQPMY</td></tr><tr><td>Tubes Eppendorf de 1,5 mL</td><td>Axygène</td><td>MCT-175-C</td><td></td></tr><tr><td>Mélange dNTP 10mM</td><td>Thermo Scientific</td><td>R0193</td><td></td></tr><tr><td>Tubes coniques de 50 mL</td><td>Greiner Bio-One</td><td>227 261</td><td></td></tr><tr><td>5x tampon de réaction Phusion HF</td><td>New England BioLabs</td><td>B0518S</td><td></td></tr><tr><td>Acide acétique, glaciaire</td><td>Fisher Chemical</td><td>BP2401C-212</td><td></td></tr><tr><td>sel d’hémisulfate d’adénine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9126-100G</td><td></td></tr><tr><td>Agar, granulé</td><td>Apex Chemicals et Réactifs</td><td>20-275</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Produits de recherche d’Apex Bioresearch</td><td>20-102GP</td><td></td></tr><tr><td>Stérilisateur à vapeur Autoclave Amsco Century</td><td>Steris</td><td>SV-1262</td><td></td></tr><tr><td>Eau DI autoclavée</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Auxine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat#I3750-5G-A ; CAS : 87-51-4</td><td></td></tr><tr><td>Cargille Laser Liquid</td><td>Laboratoires Cargille</td><td>20130</td><td></td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S1876-500G</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (40,6-Diamidino-2-Phénylindole, Dihydrochlorure)</td><td>Sondes moléculaires</td><td>Cat#D1306</td><td></td></tr><tr><td>Sel de sodium à l’acide désoxyribonucléique provenant des testicules du saumon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D1626</td><td></td></tr><tr><td>Dextrose</td><td>Fisher Chemical</td><td>D16-10</td><td></td></tr><tr><td>Tétraacétate d’éthylènediamine disodique</td><td>Fisher Chemical</td><td>S811-10</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Thermo Scientific</td><td>20688</td><td></td></tr><tr><td>FIJI/ImageJ2 vs 2.14.0/1.54f</td><td>ImageJ2</td><td>https://imagej.net/software/fiji/</td><td></td></tr><tr><td>Mélangeur à vortex à vitesse fixe</td><td>VWR</td><td>https://dabos.com/product/vortex-mixers-vwr-fixed-speed-vortex-mixer-00001-24763?srsltid=AfmBOoo5TH0aoExvrrrphDaFt8XAsDqLvkjxtEUj1QWlFbWh7_gwzMObLT4&gQT=2</td><td></td></tr><tr><td>Fluorescent microscope DV Ultra</td><td>Leica</td><td>https://www.leica-microsystems.com/c/am/lsr-w/fluorescence-microscope-wf/?nlc=20250214-SFDC-022570&utm_source=google&utm_medium=cpc&utm_campaign=25-AM-LSR-L3-LSPO-LSWF-SE-Google-Ads-WF-Thunder-Search&utm_content=text_ad&utm_term=fluorescence%20microscopes&gad_source=1&gad_campaignid=170130111&gbraid=0AAAAADrbsAF-dGDbxzgT8m_cvXSlf4BB0&gclid=CjwKCAjwmenCBhA4EiwAtVjzmkMJUGFksaHezZvlBUlbbS1tR8RqXP24dbSRzcRgTT8RmJy7nyeThBoC3yQQAvD_BwE</td><td>Feuilleton # : NV01063. Non plus pris en charge</td></tr><tr><td>Formaldéhyde</td><td>Fisher Chemical</td><td>Cat#F79-500</td><td></td></tr><tr><td>Appareil en gel</td><td>Thermo Scientific</td><td>Owl EasyCast B1</td><td></td></tr><tr><td>Mélange d’échelle d’ADN GeneRuler</td><td>Fermentas</td><td>SM0333</td><td></td></tr><tr><td>Perles de verre</td><td>Fisher Scientific</td><td>11312A</td><td></td></tr><tr><td>Lames en verre</td><td>VWR</td><td>48300-026</td><td></td></tr><tr><td>Vibrateur de plateforme Innova 2300</td><td>Nouveau-Brunswick</td><td>NB-2300</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimtech</td><td>06-666</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse de laboratoire pour tubes de 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>2525</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse de laboratoire pour tubes de 50 mL</td><td>Eppendorf</td><td>5804</td><td></td></tr><tr><td>Dihydrate d’acétate de lithium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L4158-250G</td><td></td></tr><tr><td>Maître cycleur Nexus X2</td><td>eppendorf</td><td>https://www.eppendorf.com/us-en/Products/PCR/Thermocyclers/Mastercycler-nexus-X2-p-PF-82586</td><td></td></tr><tr><td>Micro-pipettes p2, p20, p200 et p1000 et embouts correspondants</td><td>Rainin</td><td>L-2XLS+R, L-20XLS-R, L-200XLS-R, L-1000XLS-R</td><td></td></tr><tr><td>Verre de revêtement de microscope</td><td>Fisher Scientific</td><td>12541014</td><td></td></tr><tr><td>Nocodazole</td><td>Calbiochem</td><td>Cat#487928 ; CAS : 31430-18-9 ; Lot#B35705</td><td></td></tr><tr><td>Orange G</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O7252</td><td></td></tr><tr><td>CHEVILLE</td><td>Recherche à Hampton</td><td>HR2-591</td><td></td></tr><tr><td>Peptone granulé &nbsp ;</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP9725-5</td><td></td></tr><tr><td>Phusion HF ADN polymérase</td><td>New England BioLabs</td><td>M0530L</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-X</td><td>Rainin</td><td>PX-100R</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate de potassium, dibase</td><td>Thermo Scientific</td><td>424195000</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate de potassium, monobase</td><td>Thermo Scientific</td><td>424200025</td><td></td></tr><tr><td>Source d’alimentation</td><td>Bio-Rad</td><td>23786</td><td></td></tr><tr><td>Commence à acquérir Ultra 1.2.2</td><td>softWoRx Cytiva</td><td>Obtenir avec DV Ultra</td><td></td></tr><tr><td>Tris Base</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP152-10</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9002-93-1</td><td></td></tr><tr><td>Rotateur tubulaire</td><td>VWR</td><td>10136-084</td><td></td></tr><tr><td>Bain d’eau</td><td>VWR</td><td>WBE10A11B</td><td></td></tr><tr><td>Eau, ultra pure</td><td>Produits de recherche d’Apex Bioresearch</td><td>18-194</td><td></td></tr><tr><td>Extrait de levure granulé</td><td>Bioréactifs de Fisher</td><td>BP9727-5</td><td></td></tr></tbody></table>

manipulation et analyse des processus dépendants du cycle cellulaire chez les levures bourgeonnantes

Manipulation and Analysis of Cell Cycle-Dependent Processes in Budding Yeast

Manipulation et analyse des processus dépendants du cycle cellulaire chez les levures bourgeonnantes

Eukaryotic cells follow a conserved cell cycle that regulates diverse processes, including DNA maintenance and organelle homeostasis. Studying cellular ...

manipulation-analysis-cell-cycle-dependent-processes-budding

Research

Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Délétion du gène et surexpression de la protéine sont des méthodes courantes pour l'étude des fonctions des protéines. Dans cet article, nous décrivons un protocole pour l'analyse du développement phénotype en fonction de la concentration de protéines au niveau de la population et une seule cellule...

Analyse du développement d&#39;un phénotype morphologique en fonction de la concentration de protéines dans la levure bourgeonnante

Déterminer la position du cycle cellulaire d'une population de cellules, ou de comprendre comment les signaux affectent la prolifération, peut être facilement mesurée par cytométrie en flux en utilisant ce protocole. Nous rapportons une approche expérimentale simple pour coloration des cellules et de quantifier leur position dans le cycle cellulaire.

Analyse de la situation du cycle cellulaire dans les cellules de mammifères

Nous présentons un protocole simple d'obtenir des films de microscopie par fluorescence de cellules de levure en croissance, et un logiciel GUI basée à extraire des données de séries chronologiques unicellulaires. L'analyse comprend lignée automatisé et l'affectation du temps de division intégrée à l'inspection visuelle et la conservation manuelle de données à chenilles.

L&#39;acquisition de fluorescence Time-lapse films de levure bourgeonnante et analyse de la dynamique de cellules uniques en utilisant des greffes

La levure de fission, Schizosaccharomyces pombe est un excellent modèle pour étudier la cytocinèse, la dernière étape de la division cellulaire. Nous décrivons ici une approche de microscopie pour analyser différents événements cytokinétique dans des cellules vivantes de levure fission.

Analyse spatiotemporelle des cytokinétique événements dans la levure de Fission

Levure bourgeonnante est un modèle avantageux pour l' étude de la dynamique des microtubules in vivo en raison de sa génétique puissante et la simplicité de son cytosquelette de microtubules. Le protocole suivant décrit comment transformer des cellules de levure et de culture, d'acquérir des images de microscopie confocale, et analyser quantitativement la dynamique des microtubules dans les cellules vivantes de levure.

L&#39;imagerie à haute résolution et d&#39;analyse de l&#39;individu Astral microtubules Dynamique dans la levure bourgeonnante

Inherent Dynamics Visualizer est un ensemble de visualisation interactif qui se connecte à un outil d’inférence de réseau de régulation génique pour une génération améliorée et rationalisée de modèles de réseau fonctionnels. Le visualiseur peut être utilisé pour prendre des décisions plus éclairées pour paramétrer l’outil d’inférence, augmentant ainsi la confiance dans les modèles résultants.

Inherent Dynamics Visualizer, une application interactive pour évaluer et visualiser les résultats d’un pipeline d’inférence de réseau de régulation de gènes

La microscopie time-lapse est un outil précieux pour étudier la méiose chez la levure bourgeonnante. Ce protocole décrit une méthode qui combine la synchronisation du cycle cellulaire, la microscopie accélérée et l’épuisement conditionnel d’une protéine cible pour démontrer comment étudier la fonction d’une protéine spécifique pendant la ségrégation chromosomique méiotique.

Utilisation de la microscopie accélérée et de l’épuisement nucléaire spécifique au stade des protéines pour étudier la méiose chez S. cerevisiae

L’un des défis de l’analyse des expériences de séries chronologiques synchronisées est que les expériences diffèrent souvent par la durée de récupération de la synchronie et la période du cycle cellulaire. Ainsi, les mesures de différentes expériences ne peuvent pas être analysées globalement ou facilement comparées. Ici, nous décrivons une méthode d’alignement des expériences pour permettre des comparaisons spécifiques à la phase.

Alignement de données de séries chronologiques synchronisées à l’aide du modèle de synchronisation de perte de cycle cellulaire caractérisant pour les comparaisons entre expériences

Dans cet article nous présentons un protocole général pour la mesure de la durée de vie réplicative des cellules mères de la levure.

Mesure Life Span réplicative dans la levure bourgeonnante

Quantitatives de fluorescence Live Cell-microscopie Analyse de la levure à fission

Découvrez la synchronisation du cycle cellulaire chez Saccharomyces cerevisiae pour étudier la ségrégation chromosomique et la localisation protéique. Cette méthode révèle les dynamiques mitotiques essentielles à la division cellulaire.

Manipulation et analyse des processus dépendants du cycle cellulaire chez les levures bourgeonnantes

Explorer plus de vidéos