בידוד תאי מזותל: טכניקה לבידוד תאים מזותליים ראשוניים מדגימת רקמת אומנטום אנושית

תאי מזותל ראשוניים אנושיים, או HPMCs, מרפדים איברים קרביים רבים כמו האומנטום או שכבת רקמת השומן הקיימת בחלל הצפק.

כדי לבודד את תאי המזותל, התחל בטבילת דגימת אומנטום אנושית במאגר מתאים כדי להסיר את עודפי כדוריות הדם האדומות או RBCs. לאחר מכן, הניחו את האומנטום בכלי זכוכית וטחנו אותו לחתיכות. זה מנתק את הרקמה, ומשחרר HPMCs יחד עם ה-RBCs המזהמים.

העבירו את החלקים לצינור חרוטי והניחו להם להישאר דוממים למשך הזמן הרצוי. הרקמה הטחונה העשירה בשומן בצפיפות נמוכה עולה למעלה, ואילו הרכיבים התאיים הצפופים מתיישבים בתחתית. לאחר מכן, שאבו את הנוזל בתחתית, המכיל HPMCs ו-RBCs, לתוך צינור טרי.

צנטריפוגה לאיסוף התאים. הסר את ה-supernatant המכיל חוצץ. השעו מחדש את הגלולה במצע גידול מזותליאלי ודגרו למשך הזמן הרצוי. המדיה מקלה על צמיחה סלקטיבית של HPMCs על פני RBCs.

התבונן בתאים באמצעות מיקרוסקופ אור כדי לאשר את הצמיחה של תאי מזותל אנושיים בצורת קובואיד

.

עם רכישת דגימת אומנטום אנושית כירורגית, טבלו מיד את הדגימה ב-PBS בטמפרטורת החדר. תוך שעתיים מהטבילה, העבירו את האומנטום לצינור חרוטי של 50 מיליליטר המכיל 20 מיליליטר PBS טרי. העבירו את שטיפת ה-PBS הנותרת המכילה את תאי המזותל האנושיים העיקריים או HPMC ותאי דם אדומים לצינור חרוטי חדש של 50 מיליליטר וסובבו את התאים.

לאחר מכן, שפכו את תכולת הצינור לתבנית ת